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文檔簡介
1、目的:探索應用血清蛋白質組學技術分離和鑒定頭頸部腫瘤標志物,尋找舌癌早期診斷、病程監(jiān)測以及預后判斷的血清學指標。建立血清蛋白質組學技術平臺,為今后的研究奠定基礎。 方法:通過裸鼠皮下多點接種人舌癌細胞(Tca8113),建立移植瘤動物模型。在成瘤后收集血清,對血清樣品進行預處理,去除高豐度的白蛋白。采用雙向聚丙烯酰氨凝膠電泳分離血清中的蛋白,通過考馬斯亮藍染色和硝酸銀染色,對比實驗組與差異組的血清蛋白譜。利用PD-Quest分析
2、軟件尋找差異表達的蛋白,通過基質輔助激光解吸飛行時間質譜鑒定目的蛋白。收集臨床舌癌患者的血清和手術標本,利用RT-PCR、WesternBlotting以及免疫組化染色技術,驗證目的蛋白在mRNA以及蛋白質水平上的差異表達。 結果:通過雙向凝膠電泳,分離和鑒定了5個差異表達的蛋白。其中鱗狀細胞癌抗原-1與舌癌密切相關。通過RT-PCR、WesternBlotting以及免疫組化染色技術,發(fā)現(xiàn)鱗狀細胞癌抗原-1的mRNA在舌癌組織
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