應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)篩選胰腺癌早期診斷血清標記物.pdf

1、胰腺癌(pancreatic carcinoma,PC)是一種惡性程度極高、治療困難、預(yù)后差的消化道腫瘤,5年生存率僅1％-5%。早期診斷困難,現(xiàn)有的診斷標記物:糖抗原19-9(CA19-9)、癌胚抗原(CEA)、糖鏈抗原50(CA50)等都普遍存在著特異性差、敏感性低、假陽性率高等缺陷,因此臨床上亟需尋找新的胰腺癌相關(guān)分子標記物。本研究利用蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)相關(guān)技術(shù):雙向熒光差異凝膠電泳(Fluorescence2-D

2、 Difference Gel Electrophoresis,2D-DIGE)和基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)篩選并鑒定了胰腺癌患者、慢性胰腺炎(chronic pancreatitis,CP)患者、胰腺良性腫瘤(pancreatic benign tu

3、mor)患者以及健康對照組外周血清中差異表達蛋白,成功篩選出了胰腺癌早期診斷候選血清標記物。
　　目的:
　　(1)檢測2D-DIGE聯(lián)合MALDF-TOF-MS技術(shù)篩選胰腺癌患者血清生物標志物的重復(fù)性和穩(wěn)定性;
　　(2)利用比較蛋白質(zhì)組學(xué)方法對胰腺癌患者血清和對照組血清進行分析,尋找胰腺癌潛在的特異性候選標記物,并且為胰腺癌的的發(fā)病機制和早期診斷提供理論依據(jù)和新思路。
　　方法:
　　(1)雙向差異凝膠

4、電泳(2D-DIGE)分離40例胰腺癌患者、10例慢性胰腺炎患者、10例良性腫瘤患者和40例健康體檢者外周血清蛋白質(zhì),篩選出胰腺癌差異表達蛋白點;
　　(2)基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spe-ctrometry,MALDI-TOF-MS)技術(shù)對差異顯著的蛋白點進行鑒定,篩選出與胰腺癌早期診斷相關(guān)的

5、差異表達蛋白。
　　結(jié)果:
　　成功鑒定出3個胰腺癌差異表達蛋白:補體3(complement component3,C3)、轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(Transthyretin,TTR)和載脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)。
　　結(jié)論:
　　(1)2D-DIGE聯(lián)合MALDF-TOF-MS技術(shù)篩選胰腺癌患者外周血清中的特異性生物標志物的方法具有較好的重復(fù)性和穩(wěn)定性;
　　(2)炎癥介導(dǎo)因子C3