胰腺癌肝轉移相關分泌蛋白質的蛋白組學初步研究.pdf

1、目的：比較具有相同遺傳背景、不同肝轉移潛能的人胰腺癌細胞株L3.6 pl和Colo-357的分泌蛋白質譜的差異，篩選及鑒定與胰腺癌肝轉移相關的分泌蛋白質，為闡明胰腺癌定向肝轉移機制、尋找胰腺癌肝轉移早期診斷、預后判斷及藥物治療新靶點提供理論依據(jù)。
　　 方法：應用雙向電泳技術分離一對來自同一親本、具有不同肝轉移潛能的人胰腺癌細胞株L3.6 p1和Colo-357的分泌蛋白質，圖像分析軟件篩選出兩者差異表達的蛋白質點，利用基質輔助

2、激光解析電離飛行時間質譜(MALDI-TOF-MS)對部分差異蛋白點進行鑒定。利用Western blot印跡法檢測差異分泌蛋白質組織蛋白酶D前體、表皮型脂肪酸結合蛋白在兩株細胞中的表達水平。
　　 結果：建立了L3.6 pl和Colo-357細胞分泌蛋白質的雙向電泳圖譜，識別出差異表達的蛋白質點20個，質譜鑒定出5個蛋白質點，其中組織蛋白酶D前體、表皮型脂肪酸結合蛋白在高肝轉移潛能細胞株L3.6 pl中的表達水平高于低肝轉移潛

3、能細胞株Colo-357，而視黃醛脫氫酶1、二磷酸核苷激酶B、膜連蛋白A1在L3.6 p1細胞株中的表達水平低于Colo-357細胞株。Western印跡法分析證實了組織蛋白酶D前體和表皮型脂肪酸結合蛋白在L3.6 pl和Colo-357細胞分泌蛋白質中的差異表達水平與比較蛋白組學研究結果一致。
　　 結論：高、低不同肝轉移潛能的胰腺癌細胞株分泌蛋白質的表達存在明顯差異，兩者間的差異蛋白可能與胰腺癌肝轉移密切相關，胰腺癌肝侵襲轉