參芪扶正注射液研究.pdf

1、參芪扶正注射液是用黃芪、黨參制成的，具有扶正固本、益氣補(bǔ)虛、活血化瘀的功效。參芪扶正注射液是首家批準(zhǔn)上市的純中藥澄明大輸液，不僅是腫瘤患者理想的保護(hù)造血系統(tǒng)功能、改善免疫功能及生活質(zhì)量的輔助治療藥物，而且是冠心病、心絞痛、中風(fēng)患者較理想的治療藥物。 本研究在改良傳統(tǒng)制劑工藝的基礎(chǔ)上，按照處方篩選獲得的最終制劑處方制成注射用參芪扶正注射液（小水針）。根據(jù)藥品注冊(cè)管理辦法的規(guī)定，屬于中藥、天然藥物八類(lèi)“改變國(guó)內(nèi)已上市銷(xiāo)售中藥、天然藥

2、物劑型的制劑?！?一、工藝研究 1.總皂苷的提取與純化工藝 1.1總皂苷的提取 以總皂苷含量為指標(biāo)，對(duì)乙醇濃度、用量、提取次數(shù)及提取時(shí)間進(jìn)行正交試驗(yàn)，確定總皂苷的最佳提取工藝為6倍量的7O％乙醇加熱回流提取3次，90min/次。驗(yàn)證性試驗(yàn)說(shuō)明工藝最優(yōu)。 1.2總皂苷的純化 分別進(jìn)行了不同吸附樹(shù)脂對(duì)總皂苷的靜態(tài)吸附量和對(duì)總皂苷靜態(tài)吸附-洗脫性能試驗(yàn)，結(jié)果表明D-101型樹(shù)脂最佳。對(duì)D-101

3、樹(shù)脂參芪總皂苷動(dòng)態(tài)吸附性能進(jìn)行了測(cè)定，飽和吸附量為240.3mg，動(dòng)態(tài)吸附率為10.78mg/ml。對(duì)不同體積分?jǐn)?shù)乙醇及用量對(duì)黃芪總皂苷洗脫性能進(jìn)行了考察，結(jié)果表明黃芪總皂苷主要集中在20％乙醇到80％乙醇洗脫部分，因此，洗脫工藝為上樣后先以蒸餾水脫雜質(zhì)后，繼以80％乙醇洗脫參芪總皂苷部位，用量各為4倍量樹(shù)脂柱體積。驗(yàn)證性試驗(yàn)純化工藝最優(yōu)。 1.3總皂苷提取物干燥條件的研究 以干燥前后總皂苷重量差為指標(biāo)，對(duì)干燥時(shí)間、干燥

4、溫度、干燥真空度進(jìn)行正交試驗(yàn)，確定干燥工藝為干燥真空度為0.06Mpa，干燥溫度為60℃下干燥時(shí)間6小時(shí)。驗(yàn)證性試驗(yàn)說(shuō)明干燥條件最優(yōu)。 2.總多糖的提取與純化工藝 2.1蒸餾水提取條件的優(yōu)選 以多糖的總質(zhì)量為指標(biāo)對(duì)加水量、提取時(shí)間、提取溫度、提取次數(shù)進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，確定工藝為加水10倍量，提取時(shí)間1.5h，提取溫度60℃，提取次數(shù)2次。驗(yàn)證性試驗(yàn)說(shuō)明提取條件最優(yōu)。 2.2醇沉條件的優(yōu)選 以多糖質(zhì)量為

5、醇沉指標(biāo)，對(duì)乙醇體積分?jǐn)?shù)、藥液濃縮程度、靜置時(shí)間進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)。確定工藝為醇沉?xí)r乙醇體積分?jǐn)?shù)為7O％，藥液濃縮至4mL藥液/g生藥，靜置時(shí)間為24小時(shí)。驗(yàn)證性試驗(yàn)說(shuō)明醇沉條件最優(yōu)。 2.3總多糖提取物干燥條件的研究 以干燥前后總多糖重量差為考察指標(biāo)，對(duì)干燥時(shí)間、干燥溫度、干燥真空度進(jìn)行正交試驗(yàn)篩選，確定干燥工藝為在干燥真空度為0.07MPa，干燥溫度為60℃下干燥時(shí)間4小時(shí)。驗(yàn)證性試驗(yàn)表明干燥條件最優(yōu)。 3.制劑成

6、型工藝 對(duì)增溶劑用量、pH 值、活性炭用量及滅菌工藝進(jìn)行了研究，確定制劑成型工藝：取處方量黨參、黃芪總皂苷及總多糖提取物，加9000ml注射用水使溶解，加吐溫-80至其含量為0.5％，加聚維酮K30至其含量為0.5％，用10％氫氧化鈉溶液調(diào)pH值6.5～7.5，補(bǔ)加注射用水至10000ml，加0.5％活性炭室溫下攪拌1小時(shí)，過(guò)濾脫炭，0.22μm微孔濾膜精濾，灌裝于10ml安踣瓶中，每瓶10ml，100℃滅菌60min，即得。

7、 二、質(zhì)量研究 1總皂苷含量測(cè)定 照分光光度法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄VA）測(cè)定。以0.5 m1供試品溶液中對(duì)照品的量（mg）為橫坐標(biāo)、吸收度值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得線(xiàn)性方程為Y=3.56X-0.0096,R=0.9987,在0～0.20mg范圍內(nèi)線(xiàn)性良好。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD=1.56％，精密度實(shí)驗(yàn)RSD=0.93％，溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD=1.11％，加樣回收實(shí)驗(yàn)RSD=1.14％，三批樣品總皂苷含量分別

8、為16.5 mg、18.6 mg、19.3 mg。 2.黃芪甲苷含量測(cè)定 照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄VI D）測(cè)定。十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈-水〔35: 65〕為流動(dòng)相，蒸發(fā)光散射（ELSD）檢測(cè)器。以濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，峰面積的對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得回歸方程為：Y=1.3184X+6.7165，R=0.9984，表明進(jìn)樣量濃度的對(duì)數(shù)值在0.0114～0.1425mg／mL內(nèi)與峰面

9、積積分值的對(duì)數(shù)值之間呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD=0.86％，精密度實(shí)驗(yàn)RSD=1.90％，溶液穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)RSD=1.23％，加樣回收實(shí)驗(yàn)RSD=1.35％，三批樣品黃芪甲苷含量分別為0.71mg、0.66mg、0.70mg。 3.多糖含量測(cè)定 以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，得線(xiàn)性回歸方程為Y=13.738X-0.0578，R=0.9993。重復(fù)性實(shí)驗(yàn)RSD=1.03％，精密度實(shí)驗(yàn)RSD=0.91％，溶液穩(wěn)定性實(shí)

10、驗(yàn)RSD=0.89％，加樣回收實(shí)驗(yàn)RSD=0.77％，三批樣品多糖含量分別為30.2mg、29.6mg、29.8mg。 4.在幾種輸液中的穩(wěn)定性試驗(yàn) 對(duì)本品在生理鹽水及5％葡萄糖注射液中的穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，8小時(shí)后觀(guān)察結(jié)果，溶液無(wú)色澄明，無(wú)沉淀，變色等現(xiàn)象，總皂苷、黃芪甲苷和多糖含量無(wú)明顯變化。說(shuō)明本品與臨床常規(guī)注射溶液無(wú)明顯配伍禁忌。 三、穩(wěn)定性研究 1.影響因素試驗(yàn) 1.1強(qiáng)光實(shí)驗(yàn) 將本品置

11、于45001x±5001x照度下的光櫥內(nèi)放置10天，結(jié)果總皂苷、黃芪甲苷及總多糖含量略有下降，提示本品應(yīng)避光保存。 1.2高溫實(shí)驗(yàn) 將本品置于60℃±2℃溫度下放置10天，結(jié)果總皂苷、黃芪甲苷及總多糖含量略有下降，提示本品應(yīng)在涼處保存。 1.3高濕實(shí)驗(yàn) 將本品置于RH90％±5％濕度下放置10天，結(jié)果各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。 2.加速試驗(yàn)及長(zhǎng)期試驗(yàn) 參芪扶正注射液在40℃，RH90％加速試驗(yàn)6個(gè)月，在2