參芪扶正注射液對病毒性心肌炎小鼠氧化損傷及細胞凋亡的影響.pdf

1、目的:觀察參芪扶正注射液對病毒性心肌炎小鼠SOD、MDA及Fas/FasL的影響，探討其在病毒性心肌炎中抗氧化損傷及抗細胞凋亡的作用。
　　 方法:利用CVB3 嗜心肌型，誘導病毒性心肌炎模型。120只雄性BALB／c小鼠隨機分為五組：空白組（A）、模型組（B）、病毒唑組（C）、參芪扶正注射液（以下簡稱參芪）小劑量組（D）、參芪大劑量組（E）。接種病毒、注射藥物后，觀察小鼠的精神狀態(tài)、活動、進食等情況。分別于治療的第3、10、3

2、0天采集血液及心臟標本，采用黃嘌呤氧化酶法、硫代巴比妥酸法檢測血清SOD、MDA 含量，HE 染色觀察心肌病理變化，TUNEL及電鏡檢測細胞凋亡情況，免疫組化觀察Fas/FasL蛋白表達，RT-PCR 法半定量分析Fas、FasLmRNA的表達。
　　 結(jié)果:1、與空白組相比：模型組第4-10天時，小鼠感染癥狀最嚴重，體重下降明顯，死亡數(shù)最多（P<0.01）。與模型組相比：參芪大劑量組、參芪小劑量組、病毒唑組能不同程度的改善病毒

3、性心肌炎小鼠的一般癥狀，降低死亡率，其中參芪大劑量組最顯著（P<0.01）。2、與空白組相比：模型組第3天、第10天、第30天病理積分均升高（P<0.01），其中第10天最明顯，心肌細胞片狀變性、壞死，胞漿著色不均勻，胞膜破壞，胞核萎縮、染色變深，肌束溶解、消失，廣泛炎性細胞浸潤，病灶鄰近處可見間質(zhì)水腫，30天時炎性細胞浸潤明顯減少，可見間質(zhì)纖維細胞增生；電鏡檢測細胞超微結(jié)構(gòu)3個時點損傷均明顯，其中第10天損傷最嚴重，肌原纖維排列極度紊

4、亂、稀疏，閏盤結(jié)構(gòu)不清，線粒體變性腫脹，嵴斷裂、消失，細胞核染色質(zhì)密度增高、集邊，呈現(xiàn)凋亡樣改變，第30天可見部分線粒體變性減少，部份細胞核呈凋亡樣改變，膠原纖維局灶增多；血清SOD活性，3天時下降，10天時下降最明顯，30天時逐漸升高；MDA含量、細胞凋亡指數(shù)（AI）、Fas/FasL蛋白及mRNA的表達水平，3個時點均升高（P<0.01），其中第10天升至高峰，30天時下降。3、模型組第3天，第10天，第30天，SOD 活性與病理積

5、分呈負相關（r=-0.702,P<0.01），MDA 含量、AI、Fas/FasL蛋白及Fas/FasLmRNA的表達水平與心肌病理積分呈正相關（r=0.802,0.900，0.865，0.907，0.898，0.831,P<0.01）；AI與Fas、FasL蛋白及mRNA呈正相關（r=0.967，0.991，0.995，0.971，P<0.01）；SOD 活性與AI、Fas、FasL蛋白及mRNA呈負相關（r=-0.648，-0.75

6、2，-0.653，-0.673，-0.654，P<0.01）；MDA 含量與AI、Fas、FasL蛋白及mRNA呈正相關（r=0.720，0.814，0.738，0.755，0.737，P<0.01）。4、與模型組相比：3天時，治療組均能減輕心肌病理積分，但三組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05），參芪大劑量組、病毒唑組能改善SOD活性、MDA含量（P<0.05），參芪小劑量組無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；AI、Fas、FasL蛋白及mRNA

7、表達水平的改善，無統(tǒng)計學差異（P>0.05）；10天時，治療組均能不同程度的減輕心肌病理損傷，改善細胞超微結(jié)構(gòu)，提高SOD活性，降低MDA含量、AI、Fas、FasL蛋白及mRNA表達水平（P<0.05，P<0.01），參芪大劑量組最明顯，與病毒唑組相比有顯著差異（P<0.01）。30天時，參芪大劑量組、參芪小劑量組在改善各項指標方面，有統(tǒng)計學差異（P<0.01，P<0.05），參芪小劑量組療效優(yōu)于西藥組（P<0.05），與參芪大劑量組

8、相比，無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。
　　 結(jié)論:1、CVB3 感染BALB/c小鼠可成功建立病毒性心肌炎小鼠模型。2、氧化損傷和細胞凋亡參與了病毒性心肌炎的發(fā)病全過程，兩者呈正相關。3、參芪扶正注射液可改善病毒性心肌炎小鼠心肌細胞的病理損傷、細胞超微結(jié)構(gòu)變化。4、參芪扶正注射液可提高SOD 活性，降低MDA 含量，減輕病毒性心肌炎小鼠心肌細胞的氧化損傷。5、參芪扶正注射液可下調(diào)病毒性心肌炎小鼠心肌細胞Fas、FasL蛋白及mR