性別相關(guān)候選Dmrt基因在香魚(Plecoglossus altivelis)不同發(fā)育階段和組織中的表達(dá).pdf

1、香魚(Plecoglossus altivelis)屬胡瓜魚目、鮭亞目、香魚科、香魚屬，為一種名貴的小型洄游性魚類，是我國東南沿海地區(qū)和日本的重要淡水養(yǎng)殖品種之一。但香魚雌性生長性狀要優(yōu)于雄性，生長速度快、個(gè)體較大，市場價(jià)格比雄魚高兩倍多。因此開展香魚性別相關(guān)基因的研究具有重要的理論和實(shí)踐意義。Dmrt1和 Dmrt5基因是性別相關(guān)基因家族—Dmrt基因家族中的重要成員，具有潛在的性別調(diào)控作用。
　　本實(shí)驗(yàn)從香魚性腺轉(zhuǎn)錄組內(nèi)篩選到

2、Dmrt基因家族成員中的Dmrt1和Dmrt5的部分序列，并通過設(shè)計(jì)特異性引物驗(yàn)證和RACE技術(shù)獲得Dmrt1和Dmrt5基因的cDNA全長序列。序列比對結(jié)果顯示Dmrt1和Dmrt5均包含一個(gè)完整的開放閱讀框。氨基酸分析結(jié)果顯示，香魚 Dmrt1與虹鱒魚關(guān)系最近，氨基酸同源性達(dá)到81.5％；香魚 Dmrt5與斑馬魚Dmrt5相似度最高，為84%；系統(tǒng)進(jìn)化樹顯示香魚Dmrt1和Dmrt5基因與其他魚類聚在一起，與人、鼠相聚較遠(yuǎn)。熒光定量

3、PCR顯示：Dmrt1在成魚精巢中高表達(dá)，且在性腺分化后各時(shí)期都是精巢高表達(dá)，另外腸和脾臟中有微弱表達(dá)；仔魚期的第52-64天出現(xiàn)表達(dá)高峰；胚胎發(fā)育的原腸期表達(dá)達(dá)到最大值；Dmrt5基因在成魚中，在卵巢特異性表達(dá)，且在性腺分化后各時(shí)期都是卵巢特異性表達(dá)；幼苗時(shí)期在卵巢分化時(shí)期表達(dá)很明顯；Dmrt5基因在整個(gè)胚胎發(fā)育過程中均可檢測到表達(dá)且呈現(xiàn)遞增趨勢，在前仔魚期達(dá)到最大值。另外，Dmrt5基因在胚胎時(shí)期和精卵時(shí)期的原位雜交試驗(yàn)結(jié)果顯示：D