大鼠胰腺不同發(fā)育階段NBC1的表達研究.pdf

1、運用高密度寡核苷酸芯片建立大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)12.5，E15.5，E18.5，新生和成年)的基因表達譜，經(jīng)過生物信息學數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)許多與胰腺功能相關(guān)的基因在E18.5相對高表達，提示胚胎發(fā)育后期胰腺功能正趨于完善和成熟，這個時期是形成典型胰腺結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵階段，而胰腺結(jié)構(gòu)是胰腺發(fā)揮正常生物學功能的基礎(chǔ)。本研究從基因表達譜中篩選出NBC1(electrogenic Na+-HCO3-cotransporter)在E18.5相對性

2、高表達，旨在初步探討NBC1在胰腺發(fā)育不同階段的表達及組織細胞學定位。 運用RT-PCR技術(shù)進一步檢測NBC1在大鼠胰腺發(fā)育不同階段的mRNA表達水平，結(jié)果顯示NBC1基因表達趨勢與基因芯片檢測結(jié)果相同；分別用蛋白免疫印跡及免疫熒光技術(shù)檢測NBC1蛋白在大鼠胰腺發(fā)育不同階段(胚胎(E)E15.5、E18.5、新生后(P)0、P7、P14、P21和成年(Adult))的表達及細胞組織學定位，結(jié)果顯示NBC1在大鼠胰腺發(fā)育E15.5

3、開始出現(xiàn)表達，E18.5特異表達出現(xiàn)最高峰，新生下降直到P7第一個表達最低點，生后P14又上升形成第二個高峰，之后下降直到成年形成第二個表達最低點。NBC1在胰腺的組織細胞學定位隨著胰腺發(fā)育階段的變化而變化；胚胎期彌散分布在胰腺內(nèi)、外分泌細胞；新生之后隨著胰腺結(jié)構(gòu)的清晰可辨可發(fā)現(xiàn)NBC1表達在外分泌腺泡基底側(cè)膜和頂側(cè)膜及胰島α、β細胞膜，與腺泡細胞相比在成年期NBC1更集中于β細胞。 以上實驗結(jié)果表明NBC1在胚胎發(fā)育中后期和胰