再生障礙性貧血患者CX3CR1介導(dǎo)的T細(xì)胞趨化和黏附功能異常.pdf

1、背景與目的:再生障礙性貧血（簡(jiǎn)稱再障）是一種免疫失衡性疾病，全血細(xì)胞減少，骨髓造血功能低下，是其最明顯的臨床特征。幾乎百分之七十的再障患者病情是通過(guò)免疫抑制治療獲得改善。然而，關(guān)于觸發(fā)原始抗原及免疫侵襲對(duì)造血干細(xì)胞損傷的機(jī)制卻鮮為人知。近年來(lái)，由于免疫學(xué)技術(shù)水平的提高，促進(jìn)我們認(rèn)為再障的發(fā)病機(jī)制由于一種器官特異性T細(xì)胞介導(dǎo)作用于骨髓而引起。特異性的淋巴細(xì)胞群在遷移和微環(huán)境調(diào)控方面受到趨化因子及黏附分子多步驟調(diào)節(jié)。CX3CL1，也被稱為F

2、ractalkine，是四種類(lèi)型趨化因子中最特殊的一種，最初的描述是在表達(dá)的IL-1和TNF-活化的內(nèi)皮細(xì)胞(EC)上的，并且在人類(lèi)及小鼠組織上廣泛表達(dá)mRNA。CX3CR1（之前稱為V28的孤兒受體），具有誘導(dǎo)運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞內(nèi)鈣動(dòng)員和激活異源三聚體G蛋白，同時(shí)介導(dǎo)白細(xì)胞的遷移和黏附的能力。此外，CX3CR1的牢固黏附能力并不受百日咳毒素及靜態(tài)和生理?xiàng)l件下流動(dòng)的單核細(xì)胞，T細(xì)胞，自然殺傷(NK)細(xì)胞的作用而抑制。由于趨化因予能誘導(dǎo)某些細(xì)胞亞

3、群遷移到特定部位，因而趨化因子和趨化因子受體的相互作用被認(rèn)為是在內(nèi)壞境穩(wěn)態(tài)和炎癥中發(fā)揮重要作用。之前的研究中我們通過(guò)流式檢測(cè)了再障患者T細(xì)胞亞群的變化，結(jié)果顯示再障患者骨髓中CD3+、CD8+細(xì)胞比例均明顯升高，重型再障患者CD4+細(xì)胞比例減低。再障患者T淋巴細(xì)胞表面CX3CR1的表達(dá)無(wú)論在骨髓和外周血中CD3+/CX3CR1+、CD3+/CD4+/CX3CR1+以及CD3+/CD8+/CX3CR1+細(xì)胞比例均高于對(duì)照組，尤其是CD3+

4、/CD8+/CX3CR1+細(xì)胞比例升高尤為顯著。ELISA方法進(jìn)一步檢測(cè)了Fractalkine水平在重型與非重型再障患者骨髓中以及重型再障患者外周血漿中均升高。
　　 本研究通過(guò)探討CX3CL1/CX3CR1對(duì)獲得性再生障礙性貧血患者CD4+和CD8+T細(xì)胞遷移和黏附功能的影響進(jìn)一步揭示T細(xì)胞介導(dǎo)的再障的發(fā)病機(jī)制。此外，我們進(jìn)一步通過(guò)對(duì)CX3CR1拮抗劑F1的研究提示對(duì)CX3CR1的阻斷有望成為治療再障的新靶點(diǎn)開(kāi)辟途徑。

5、>　　 方法:1.17例重型再障患者和10例健康對(duì)照，應(yīng)用MACS免疫磁珠分選法分選CD4+和CD8+T細(xì)胞，在自身骨髓血漿或CX3CR1的配體CX3CL1的作用下通過(guò)Transwell遷移實(shí)驗(yàn)比較患者和健康對(duì)照CD4+和CD8+T細(xì)胞表面CX3CR1介導(dǎo)的趨化活性以及阻斷CX3CR1對(duì)其趨化活性的影響;
　　 2.采用細(xì)胞基質(zhì)黏附實(shí)驗(yàn)比較患者和健康對(duì)照CX3CL1/CX3CR1介導(dǎo)的CD4+和CD8+T細(xì)胞的黏附能力。