經(jīng)胃內(nèi)鏡及腹腔鏡腹腔探查對(duì)雄兔免疫炎性反應(yīng)的影響.pdf

1、目的:
　　經(jīng)自然孔道內(nèi)鏡外科(Natural Orifice Transluminal Endoscopic Surgery, NOTES)是微創(chuàng)外科領(lǐng)域的一個(gè)新概念,與傳統(tǒng)腹腔鏡技術(shù)相比具有某些潛在優(yōu)勢(shì)。然而,經(jīng)胃內(nèi)鏡外科技術(shù)與腹腔鏡技術(shù)相比,對(duì)機(jī)體免疫炎性反應(yīng)的影響如何,并未形成廣泛共識(shí)。本研究旨在建立經(jīng)胃內(nèi)鏡及腹腔鏡腹腔探查的雄兔模型,探討其安全性和可行性,并通過檢測(cè)兩者圍手術(shù)期血清炎性細(xì)胞因子的水平及外周血單個(gè)核細(xì)胞(p

2、eripheral blood mononuclear cells, PBMC)的功能變化,對(duì)比分析兩者對(duì)全身炎性反應(yīng)及細(xì)胞介導(dǎo)的免疫功能影響的差異。
　　方法:
　　16只普通級(jí)雄性日本大耳白兔,10~12周齡,體重2~2.5kg,隨機(jī)分為經(jīng)胃內(nèi)鏡腹腔探查組(N組,8只)及腹腔鏡(L組,8只)腹腔探查組,另取5只作為假手術(shù)組(S組,5只)。N組以纖維膽道鏡為主要手術(shù)器械,建立經(jīng)胃內(nèi)鏡腹腔探查模型,L組以腹腔鏡為主要手術(shù)器械

3、,建立腹腔鏡腹腔探查模型,S組不進(jìn)行手術(shù)操作,而麻醉及圍手術(shù)期處理等過程與手術(shù)組一致。觀察記錄各組術(shù)中探查情況、手術(shù)時(shí)間、并發(fā)癥、死亡等情況。分別于術(shù)前、術(shù)后4小時(shí)、24小時(shí)及72小時(shí)經(jīng)耳中動(dòng)脈采血,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)檢測(cè)血清促炎細(xì)胞因子腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)及白細(xì)胞介素-6(interleukin

4、-6, IL-6)的水平,血清抗炎細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-10(interleukin-10, IL-10)的水平,并進(jìn)行對(duì)比分析;分離提取 PBMC并在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)體外刺激下培養(yǎng),ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清液 TNF-α的水平,并進(jìn)行對(duì)比分析。
　　結(jié)果:
　　1、經(jīng)胃內(nèi)鏡及腹腔鏡腹腔探查的雄兔模型建立成功,N組平均手術(shù)時(shí)間較L組長(zhǎng);N組出現(xiàn)2例并發(fā)癥,1例于術(shù)后18小時(shí)發(fā)生胃造口漏死亡

5、,1例于術(shù)后4小時(shí)不明原因死亡,L組并發(fā)1例肝臟出血于術(shù)后4小時(shí)死亡,其余術(shù)后均存活3天以上,恢復(fù)良好,術(shù)后7天尸檢未見明顯異常。
　　2、血清促炎細(xì)胞因子 TNF-α及 IL-6在術(shù)前各組間及 S組麻醉前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;N組及 L組血清 TNF-α術(shù)后4小時(shí)明顯上升,前者上升滯后,但維持時(shí)間長(zhǎng),術(shù)后4小時(shí)血清 TNF-α水平 L組高于 N組,術(shù)后24小時(shí)則相反;N組及 L組血清 IL-6術(shù)后24小時(shí)明顯上升,前者術(shù)后72小時(shí)

6、出現(xiàn)下降,而后者不明顯,術(shù)后4小時(shí)血清 IL-6水平 L組低于 N組,而術(shù)后72小時(shí)則相反。
　　3、血清抗炎細(xì)胞因子 IL-10在術(shù)前各組間及 S組麻醉前后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;N組術(shù)后血清 IL-10較術(shù)前變化不明顯,而 L組術(shù)后24小時(shí)明顯下降,并持續(xù)至72小時(shí),術(shù)后24小時(shí)及72小時(shí)血清 IL-10水平 N組均高于 L組。
　　4、PBMC體外分泌 TNF-α的水平在各組手術(shù)前后及各時(shí)間點(diǎn)組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7、　　結(jié)論:
　　1、以雄兔為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,利用纖維膽道鏡及相關(guān)輔助器械,能順利完成經(jīng)胃內(nèi)鏡腹腔探查操作,但與傳統(tǒng)腹腔鏡腹腔探查相比,耗時(shí)更長(zhǎng),胃造口漏及鄰近臟器損傷是較為嚴(yán)重的并發(fā)癥,嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡,尚需要在手術(shù)器械及手術(shù)技巧等方面改進(jìn)。
　　2、兩種手術(shù)方式均引起全身促炎反應(yīng),這種效應(yīng)的出現(xiàn)及維持時(shí)間可能存在差異,但基本符合手術(shù)創(chuàng)傷引發(fā)全身促炎反應(yīng)的規(guī)律。
　　3、經(jīng)胃內(nèi)鏡腹腔探查術(shù)后并不造成機(jī)體抗炎反應(yīng)的顯著改變,而