殼聚糖分解細菌的分離鑒定以及殼聚糖分解液對黃瓜枯萎病的防治.pdf

1、1．殼聚糖對植物病害防治的生物活性的研究 將殼聚糖配成不同濃度的溶液，選取 6 種供試植物病原真菌 Fusarium．sp、Fusarium．acuminatum 、．Fusarium．oxysporum 、Fusarium．semitectum 、 Alternaria．solani 、Alternaria．cucumerina，發(fā)現(xiàn)離體條件下0.2﹪的殼聚糖溶液對植物病原真菌的抑制效果最好。用不同濃度的殼聚糖溶液浸種后發(fā)現(xiàn)，

2、浸種時間在1h內時，5﹪殼聚糖10倍液浸種后，種子萌發(fā)率要好于其他濃度的處理及對照。用5﹪殼聚糖10倍液浸種、沾根處理后，對黃瓜幼苗接種枯萎病病原菌，與對照組相比較，在發(fā)病前期殼聚糖處理組植株體內幾丁質酶活性會有所降低，殼聚糖處理后的植株發(fā)病率要低于對照，其中沾根處理發(fā)病率為50﹪、浸種發(fā)病率為82﹪、對照組發(fā)病率為94﹪。 2．殼聚糖分解細菌的分離、篩選 本試驗從甘肅各地采集166份土樣，用殼聚糖培養(yǎng)基對土樣中的微生物

3、進行篩選，從中篩選出2株能夠在殼聚糖培養(yǎng)基上生長的細菌SQ-2-H、H-5-B。通過實驗表明：在NA培養(yǎng)基中SQ-2-H、H-5-B對數(shù)生長期在20—32h之內，在殼聚糖培養(yǎng)基中，兩種篩選菌的最適pH在6.1—6.6之間；SQ-2-H在最適pH值下的對數(shù)生長期基本在40—70h之內，H-5-B在最適pH值下的對數(shù)生長期基本在60—72h之內。采用Schales法檢測不同培養(yǎng)時間兩種篩選菌水解殼聚糖時酶活性的變化發(fā)現(xiàn)：SQ-2-H在最適p

4、H值下培養(yǎng)50h左右酶活性最大，H-5-B在最適pH值下培養(yǎng)70h左右酶活性達到最大值。 3．篩選菌SQ-2-H、H-5-B的初步鑒定 SQ-2-H和H-5-B菌株的16S rDNA序列分析結果表明，它們分別與GenBank中已報道的Chryseobacterium sp．RHA2-18和Bacillus cereus 1Re107 16S rDNA序列有98﹪和96﹪的相似性，由系統(tǒng)樹可見SQ-2-H與H-5-B的親緣

5、關系遠，革蘭氏染色結果表明，SQ-2-H為革蘭氏陰性桿狀菌，H-5-B為革蘭氏陽性桿狀菌。 4．細菌SQ-2-H、H-5-B殼聚糖培養(yǎng)液對黃瓜枯萎病防治作用的初步研究 將篩選菌SQ-2-H、H-5-B在含速效N((NH)<,2>SO<,4>)和無速效 N 的殼聚糖培養(yǎng)基中分別連續(xù)培養(yǎng)192h，采用牛津杯抑菌圈法，每24h取培養(yǎng)液測定抑菌效果，由抑菌圈直徑大小可知：SQ-2-H在含速效N((NH)<,2>SO<,4>)殼聚