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文檔簡介
1、目的:
探討聯合補充維生素B1、B2、PP對急性低氧暴露小鼠營養(yǎng)代謝變化的影響,以期揭示維生素B1、B2、PP提高急性耐缺氧能力的代謝機制及其可能的作用靶點。
方法:
1、40只健康雄性昆明小鼠隨機分為對照組、2倍、4倍、8倍維生素B1、B2、PP補充組,以相應飼料進行為期2周的喂養(yǎng),補充組飼料中維生素劑量分別為正常對照組飼料所含相應維生素的2倍、4倍及8倍,實驗結束時采用急性密閉缺氧實驗和亞硝酸鈉中毒實驗
2、模型測定小鼠急性低氧暴露生存時間。
2、50只雄性昆明小鼠隨機分為正常對照組、低氧對照組、2倍、4倍、8倍維生素補充組,以相應飼料喂養(yǎng)2周后,除正常對照組外,其他動物在低壓氧艙內進行模擬高度為6000m、暴露時間為8h的急性低氧暴露。采用高效液相色譜技術分析血清中的維生素B1、B2、PP含量,采用相關生化方法測定與碳水化合物、脂類、蛋白質代謝相關的標志物水平與關鍵酶活性以及全血ATP含量。
3、動物喂養(yǎng)與急性低氧暴露
3、方式同2,暴露結束后采用基于核磁共振分析的代謝組學技術分析各組動物血清代謝組變化。
4、動物喂養(yǎng)與低氧暴露方式同2,暴露結束后取動物肝臟迅速置于液氮冷凍,應用基因芯片技術分析小鼠肝臟全基因表達譜的變化。
結果:
1、補充維生素B1、B2、PP對急性低氧暴露小鼠生存時間的影響
急性密閉缺氧實驗結果表明,8倍維生素B1、B2、PP補充組小鼠的缺氧生存時間與對照組相比有延長的趨勢。亞硝酸鈉中毒實驗結果表
4、明,三個補充劑量都顯現出一定的延長小鼠生存時間的作用,其中4倍及8倍組效果顯著。
2、補充維生素B1、B2、PP對急性低氧暴露小鼠營養(yǎng)代謝的影響
(1)血清維生素B1、B2、PP含量的測定結果顯示,急性低氧暴露后,小鼠血清維生素B1含量變化不明顯,維生素B2含量顯著降低,煙酰胺含量有降低的趨勢;維生素補充組小鼠血清維生素B1、B2、煙酰胺含量較低氧對照組均有不同程度的升高。
(2)生化指標的測定結果顯示,小
5、鼠血清葡萄糖、乳酸、丙酮酸、游離脂肪酸、β-羥丁酸、尿素氮和肝糖原含量在急性低氧暴露后均顯著升高,而肝臟丙酮酸脫氫酶、琥珀酸脫氫酶活性則顯著降低,全血ATP含量有降低的趨勢;補充不同劑量維生素B1、B2、PP后,上述指標的變化與低氧對照組相比有不同程度緩解的趨勢。
3、補充維生素B1、B2、PP對急性低氧暴露小鼠血清代謝組的影響
急性低氧暴露后,各組小鼠血清代謝組在得分圖中呈聚類分布,與正常對照組相比,低氧對照組呈分
6、離趨勢,補充2倍、4倍、8倍維生素B1、B2、PP后,血清代謝組呈逐漸回歸的變化軌跡。由載荷圖分析得到,導致代謝組產生差別的原因是脂類、乳酸、乙醇、O-乙酰糖蛋白、?;撬帷⑻呛凸劝滨0返任镔|水平發(fā)生了變化。
4、補充維生素B1、B2、PP對急性低氧暴露小鼠肝臟全基因表達譜的影響
急性低氧暴露以及補充8倍維生素B1、B2、PP后,小鼠肝臟基因表達譜發(fā)生了顯著變化,涉及到眾多代謝通路,其中,低氧對照組與正常對照組相比,共
7、有2476個差異表達基因,1508個基因表達上調,968個基因表達下調,共涉及159條代謝通路;8倍維生素補充組與正常對照組相比,共有2352個差異表達基因,1382個基因表達上調,970個基因表達下調,共涉及151條通路;8倍維生素組與低氧對照組相比,共有1382個差異表達基因,626個基因表達上調,756個基因表達下調,差異表達基因涉及92條代謝通路。
結論:
1、聯合補充維生素B1、B2、PP2周,可以延長急性
8、低氧暴露小鼠的生存時間,正常飼料B1、B2、PP含量的4-8倍補充劑量效果較好。
2、血清維生素B1、B2、PP的測定結果表明,急性低氧暴露使小鼠血清維生素B2、PP水平下降,高劑量的維生素B1、B2、PP補充后改善效果較明顯。生化指標測定結果表明,急性低氧暴露后,小鼠營養(yǎng)代謝及其相關酶活性發(fā)生了顯著變化,補充維生素B1、B2、PP對這些變化具有一定的改善作用。提示在急性低氧環(huán)境下,增加維生素B1、B2、PP的攝入量可以改善維
9、生素營養(yǎng)狀況和能量代謝,其中8倍劑量效果最好。
3、代謝組學的研究結果顯示,急性低氧暴露后碳水化合物的有氧氧化受到抑制,無氧酵解增強,三羧酸循環(huán)流通不暢,脂肪動員加強。補充維生素 B1、B2、PP后,血清代謝組逐漸向正常對照組回歸,相關代謝途徑也得到改善,進一步證實補充維生素B1、B2、PP通過與能量代謝相關的途徑發(fā)揮作用。
4、小鼠肝臟全基因表達譜的研究結果顯示,急性低氧暴露和8倍劑量維生素B1、B2、PP的補充引
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