同步熒光法測定藥片中的維生素b2和b6

1、1同步熒光法測定復(fù)合維生素B片中的維生素B2和B6一、實(shí)驗(yàn)背景B族維生素是一類重要的水溶性維生素，人體缺乏B族維生素可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，如口角炎等。而人體自身無法合成B族維生素，因此只能通過攝取食物獲得，也可通過服用維生素藥片加以補(bǔ)充。因此，各種維生素B的含量測定對于復(fù)合維生素B片的質(zhì)量評價十分重要。二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)和掌握同步熒光光譜法測定的原理。2、學(xué)習(xí)和掌握熒光分光光度計的使用方法。3、學(xué)習(xí)用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量分析。三、實(shí)驗(yàn)原

2、理B族維生素中，維生素B2和維生素B6為熒光物質(zhì)，因此可采用熒光光譜法對其進(jìn)行定量測定。但由于它們的熒光光譜部分重疊，從而影響了同時定量分析的準(zhǔn)確性。同步熒光光譜法是熒光分析中的一種重要技術(shù)。與常規(guī)熒光分析法相比，同步熒光分析法具有簡化譜圖、提高選擇性、減少光散射干擾等特點(diǎn)，尤其適合多組分混合物的分析。同步熒光分析法與常規(guī)熒光測定方法最大的區(qū)別是：同時掃描激發(fā)和發(fā)射兩個單色器波長，由測得的熒光強(qiáng)度信號與對應(yīng)的激發(fā)波長（或發(fā)射波長）構(gòu)成光

3、譜圖，稱為同步熒光光譜。在同步熒光測定中，當(dāng)實(shí)驗(yàn)條件一定且被測組分的濃度較低時，其同步熒光信號強(qiáng)度I與濃度c成正比，即I=Kc據(jù)此可對被測組分進(jìn)行定量分析。本實(shí)驗(yàn)采用同步熒光光譜法對復(fù)合維生素B片中的維生素B2和維生素B6進(jìn)行同時測定。以維生素B2和維生素B6混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的同步熒光光譜強(qiáng)度對其濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，再根據(jù)被測樣品溶液的同步熒光強(qiáng)度，由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出復(fù)合維生素B片中維生素B2和維生素B6的含量。四、儀器與試劑1、儀器F4600

4、熒光分光光度計（日立），1cm石英樣品池，分析天平，研缽，25mL、100mL容量瓶，5ml、10ml吸量管，吸耳球。2、試劑維生素B2（40gmL），維生素B6（5gmL），0.2molLNa2HPO40.1molL檸檬酸緩沖溶液（pH7.0），復(fù)合維生素B片。五、實(shí)驗(yàn)步驟1、維生素混合溶液的配制分別準(zhǔn)確移取0.50mL、1.00mL、1.50mL、2.50mL、3.50mL維生素B2、維生素B6于25mL的容量瓶中，加入10mL緩沖

5、溶液，用水稀釋至刻度，搖勻，得到15號維生素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。33、復(fù)合維生素B片維生素B2和B6的含量測定B2B6熒光強(qiáng)度I含量(mgg)七、思考題1、簡述熒光光譜法的基本原理。與吸收光譜法相比，熒光光譜法有哪些特點(diǎn)？2、為什么同步熒光法可使光譜簡化、譜帶變窄？3、Δλ值對同步熒光光譜有哪些影響？八、參考文獻(xiàn)[1]許金鉤，王尊本.熒光分析法（第三版）北京：科學(xué)出版社，2006[2]朱明華，胡坪.儀器分析（第四版），北京：高等教育出版社，2