慢性腦缺血鼠認知功能障礙與細胞因子TGF-β-,1-、Bcl-2、BDNF、NGF的表達.pdf

1、目的：探討慢性腦缺血大鼠的空間記憶能力與額葉皮質及海馬CA1區(qū)細胞因子TGF-β<,1>、Bcl-2、BDNF、NGF表達的動態(tài)變化及相互關系，并給予尼莫地平、尼麥角林腹腔注射，觀察治療后大鼠記憶能力及細胞因子TGF-β<,1>、Bcl-2、BDNF、NGF表達的變化規(guī)律，為臨床治療血管性癡呆提供理論依據(jù)。 方法：選取90只健康雄性Wistar大鼠，采取永久結扎大鼠雙側頸總動脈的方法，制備與人類慢性腦缺血比較相似的慢性腦缺血大鼠

2、模型。術后2周給予尼莫地平注射液（0.5mg/kg）、注射用尼麥角林（1mg/kg）腹腔注射，每天一次，直至處死。手術后1、3、7、14、28天分別對術后大鼠進行卒中指數(shù)、神經病學癥狀評定。手術后2周、4周、8周、12周、16周應用Y迷宮檢測各組大鼠的空間辨別記憶能力。采用HE染色，光鏡觀察各組大鼠腦組織的形態(tài)學變化情況：應用免疫組織化學方法檢測大鼠額葉皮質、海馬CA1區(qū)細胞因子TGF-β<,1>、Bcl-2、BDNF、NGF表達的動態(tài)

3、變化。應用SPSS12.0軟件進行統(tǒng)計學分析，首先進行正態(tài)分布檢驗及方差齊性檢驗，各組間比較用單因素方差分析，兩兩比較應用q檢驗。 結果： 1．慢性前腦缺血鼠認知功能改變雙側頸總動脈結扎后3天，卒中指數(shù)與神經病學指數(shù)二項指標均接近正常，無運動障礙。采用Y迷宮檢測各組大鼠術后空間記憶能力，結果如下：術后2周大鼠記憶功能下降，個體差異很大，部分大鼠的Y迷宮正確次數(shù)明顯減少；缺血4周時大鼠記憶能力比對照組明顯下降，差異顯著P＜

4、0.01。以后Y迷宮正確次數(shù)逐漸減少，缺血4個月時與對照組比較下降最明顯。尼莫地平組、尼麥角林組分別在各時間點Y迷宮正確次數(shù)明顯增加，與缺血組比較差異具有顯著性意義，P<0.01。尼麥角林組Y迷宮正確次數(shù)較尼莫地平組明顯增加，差異具有顯著性意義，P<0.01。 2．組織病理學改變對照組大鼠皮質、海馬區(qū)神經細胞形態(tài)及分布正常。大鼠缺血1周，額葉皮質、海馬及尾狀核等部位部分神經細胞濃染，核濃染、固縮，頂樹突延長，胞體呈三角形，胞漿致

5、密，周圍出現(xiàn)空隙區(qū)。缺血2～4周，3只大鼠尾狀核、額葉皮質和胼胝體區(qū)出現(xiàn)梗塞灶。額葉皮質和海馬CA1區(qū)神經細胞變性、壞死、脫失，膠質細胞增生。缺血8周以后未見明顯梗塞灶，皮質及海馬CA1區(qū)可見變性壞死的神經細胞逐漸減少，但細胞脫失逐漸加重，膠質細胞增生逐漸減輕，腦室擴張，皮質萎縮變薄。尼莫地平組及尼麥角林組大鼠額葉皮質及海馬CA1區(qū)神經細胞變性、壞死、脫失及膠質細胞增生均較缺血組減輕。 3．額葉皮質與海馬CA1區(qū)TGF-β<,1

6、>、Bc1-2、BDNF、NGF的表達 對照組額葉皮質與海馬CA1區(qū)均有微弱的TGF-β<,1>表達。缺血1周時額葉皮質與海馬CA1區(qū)TGF-β<,1>表達開始增高，2周時達高峰，以后逐漸下降，額葉皮質12周、海馬CA1區(qū)8周時TGF-β<,1>表達仍高于對照組，P<0.05。尼莫地平組及尼麥角林組，與缺血組各時間點比較額葉皮質與海馬CA1區(qū)TGF-β<,1>表達顯著增加，P<0.01。尼麥角林組額葉皮質與海馬CA1區(qū)TGF-β

7、<,1>表達明顯高于尼莫地平組，差異有顯著性，P<0.05。 對照組額葉皮質與海馬CA1區(qū)有少量的Bc1-2陽性細胞表達。缺血1周時額葉皮質與海馬CA1區(qū)額葉皮質與海馬Bc1-2表達開始增高，2周時達高峰，以后逐漸下降，額葉皮質至12周時與對照組比較仍有顯著性差異，P<0.05；海馬CA1區(qū)4周時與對照組比較仍有顯著差異，P<0.01。尼莫地平組及尼麥角林組，與缺血組各時間點比較額葉皮質與海馬Bc1-2表達顯著增加，P<0.01

8、。尼麥角林組額葉皮質與海馬Bc1-2表達明顯高于尼莫地平組，差異有顯著性，P<0.05。 對照組額葉皮質與海馬CA1區(qū)有少量的BDNF陽性細胞表達。缺血1周時額葉皮質與海馬CA1區(qū)BDNF表達開始增高，2周時達高峰，以后逐漸下降，額葉皮質至12周時與對照組比較仍有顯著性差異，P<0.05。海馬CA1區(qū)8周時與對照組比較仍有顯著差異，P<0.01。尼莫地平組及尼麥角林組，與缺血組各時間點比較額葉皮質與海馬BDNF表達均有顯著性增高

9、，P<0.01。尼麥角林組額葉皮質與海馬BDNF表達明顯高于尼莫地平組，差異有顯著性，P<0.05。 對照組額葉皮質與海馬CA1區(qū)有少量NGF陽性細胞的表達。缺血1周時額葉皮質與海馬CA1區(qū)NGF表達開始增高，2周時達高峰，以后逐漸下降，額葉皮質至12周時與對照組比較仍有顯著性差異，P<0.05。海馬CA1區(qū)12周時與對照組比較仍有顯著差異，P<0.05。尼莫地平組及尼麥角林組，與缺血組各時間點比較額葉皮質與海馬NGF表達均顯著

10、性增高，P<0.05。尼麥角林組額葉皮質與海馬CA1區(qū)NGF表達明顯高于尼莫地平組，差異有顯著性，P<0.05。 結論： 1．雙側頸總動脈永久結扎的慢性腦缺血鼠出現(xiàn)認知功能進行性減退。 2．雙側頸總動脈永久結扎可引起實驗大鼠額葉皮質錐體細胞進行性脫失伴膠質細胞增生，海鳥CA1區(qū)錐體細胞嚴重脫失伴基質疏松、微空泡形成。 3．細胞因子TGF-β<,1>、Bcl-2、BDNF、NGF不僅參與了雙側頸總動脈結扎大