組織工程室內(nèi)脂肪組織存活及生長的研究.pdf

1、脂肪移植在整形外科有廣闊的應用范圍。組織工程室的應用為組織工程提供了另外一條可行的途徑。本課題擬研究帶蒂脂肪瓣以及游離移植的脂肪在組織工程室內(nèi)的存活及誘導自身脂肪組織從頭合成，為更好的促進移植脂肪的存活和進一步闡明脂肪從頭合成的機制。
　　帶蒂脂肪瓣移植因為其移植后應用顯微外科技術(shù)即刻重建脂肪內(nèi)部的血液循環(huán)，移植后體積縮小少，能取得移植的最佳效果。但帶蒂脂肪供區(qū)有限，切取大量脂肪后易導致供區(qū)繼發(fā)畸形，這限制了帶蒂脂肪瓣移植在臨床的

2、應用。游離脂肪移植因手術(shù)操作簡單，加之脂肪抽吸技術(shù)的廣泛開展，使得游離移植脂肪在臨床上更加普及。但是游離移植脂肪后脂肪體積的縮小可高達70％，因其不可預見性以及高吸收率，也限制了其在臨床的應用。
　　在體內(nèi)應用生物惰性材料制作而成的組織工程室能為擬構(gòu)建的組織提供一個良好的生長空間，如果把在體血管也轉(zhuǎn)移入組織工程室，在體血管可通過出芽生長的方式逐漸擴展固有血管網(wǎng)絡，為室內(nèi)生長的組織提供血管化的基礎(chǔ)及營養(yǎng)物質(zhì)。表面帶孔的組織能更好的促

3、進室內(nèi)組織的生長，可能加大了室內(nèi)外營養(yǎng)物質(zhì)的交流。組織工程室在體內(nèi)構(gòu)建出的相對獨立的空間有利于研究特定組織的發(fā)生發(fā)展過程。
　　本課題擬在兔體內(nèi)利用帶蒂脂肪瓣，外覆以硅膠制作的組織工程室，構(gòu)建出更大體積的脂肪瓣，使得脂肪瓣向皮膚一樣經(jīng)擴張器擴張后由小變大，繼而移植后減輕供區(qū)繼發(fā)畸形，并提供更多的脂肪組織來修復缺損以獲得滿意的外形。表面帶孔的組織工程室內(nèi)可積聚大量的組織滲液，我們同時擬觀察這些組織液能否支撐自體脂肪的存活及生長，并對

4、組織工程室內(nèi)組織滲液進行細胞學檢測、生化檢測、生長因子含量檢測以及以及探討異種脂肪移植到組織工程室內(nèi)部分存活及誘導兔自身脂肪從頭合成的機制。
　　1.組織工程室內(nèi)帶蒂脂肪瓣自發(fā)生長的研究
　　目的：初步探索組織工程室在兔體內(nèi)脂肪組織工程中的應用；建立研究兔體內(nèi)脂肪組織自發(fā)生長的動物模型。方法：制作中空的表面帶孔的硅膠組織工程室；將兔體內(nèi)以腹壁下淺動脈為蒂的脂肪瓣轉(zhuǎn)移至中空的硅膠組織工程室后6周取材。結(jié)果：硅膠組織工程室能很好

5、的支持室內(nèi)脂肪瓣的生長；所有組織工程室內(nèi)內(nèi)容物體積增大，脂肪瓣外面形成一層結(jié)締組織構(gòu)成的包膜，包膜穿過組織工程室表面的孔與室外包膜交通。室內(nèi)內(nèi)容物體積從0.5225±0.031ml增加到3.7625±0.106ml，包膜體積大小為0.7525±0.04ml，脂肪瓣的體積從0.5225±0.031ml增加到3.01±0.135ml,增加了476％。結(jié)論：硅膠制作的組織工程室能應用到體內(nèi)脂肪組織工程，且為室內(nèi)組織提供空間生長；成功構(gòu)建了兔體

6、內(nèi)組織工程室內(nèi)脂肪組織自發(fā)生長的模型，帶蒂的脂肪組織可以在不添加任何細胞，生長因子的情況下自發(fā)生長。
　　2.兔自體顆粒脂肪在組織工程室內(nèi)存活的研究
　　目的：觀察組織工程室在沒有在體血管通過時單單依靠滲到室內(nèi)的組織液能否支持游離移植的顆粒脂肪組織的存活。方法：兔自體脂肪切取后制備成1-3mm3的顆粒狀，對照組即刻移植到兔背部皮下、實驗組1即刻移植到兔背部組織工程室，實驗組2埋置組織工程室到兔體內(nèi)20后，再移植兔自體顆粒脂肪

7、。3個月后取材。結(jié)果：所有移植的脂肪的體積均有縮小，所有實驗組的組織工程室內(nèi)均有部分脂肪存活。對照組與實驗組1脂肪組織存活體積無統(tǒng)計學上的差異，對照組、實驗組1和實驗組2相比，脂肪組織的體積有統(tǒng)計學差異。討論：組織工程室內(nèi)的滲液能夠支持移植脂肪的部分存活，延遲移植脂肪到組織工程室能提高移植脂肪的存活率。組織工程室可以再不添加任何生長因子、支架材料、營養(yǎng)物質(zhì)的前提下支持高代謝率的脂肪組織的部分存活。
　　3.組織工程室內(nèi)組織滲液的研

8、究
　　目的：觀察兩種表面孔徑不同的組織工程室內(nèi)組織滲液體積的動態(tài)變化，繪制時間-體積曲線，并對滲液做細胞學檢測；檢測室內(nèi)組織滲液總蛋白、白蛋白、糖的含量并與血清做對比；用Westernblot初步檢測組織工程室內(nèi)滲液是否含有轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β。方法：在兔體內(nèi)埋置組織工程室后，特定時間抽取組織工程室內(nèi)滲出液測量體積，抽取組織液后直接進行臺盼藍染色檢測死細胞的數(shù)量；分別在7天、14天、21天抽取室內(nèi)組織滲出液進行總蛋白、白蛋白和