家庭性阿爾茨海默病致病基因突變分析.pdf

1、背景:阿爾茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是以記憶損害和認(rèn)知障礙為臨床特征的一種進(jìn)行性神經(jīng)退行性疾病,組織病理學(xué)特征主要是老年斑、神經(jīng)纖維纏結(jié)和神經(jīng)元丟失等。隨著分子遺傳學(xué)的發(fā)展,目前已知有四個(gè)基因與家族性AD(familial Alzheimer's disease,FAD)有關(guān):早老素-1(presenilin l,PS-1)基因、早老素-2(presenilin2,PS-2)基因、淀粉樣蛋白前體(amylo

2、id precursor protein,APP)基因、Tau蛋白基因,其中PS-1基因突變是最常見的。到目前為止,已在390個(gè)家系中發(fā)現(xiàn)176個(gè)PS-1基因的突變位點(diǎn)。本研究選擇對(duì)兩個(gè)AD家系進(jìn)行上述四個(gè)基因的突變分析。
　　 目的:探討家族性阿爾茨海默病已知致病基因突變情況。
　　 方法:應(yīng)用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)、DNA直接測序和限制性內(nèi)切酶酶切等技術(shù)對(duì)1個(gè)早發(fā)

3、型家族性阿爾茨海默病(early-onset familial Alzheimer's disease,EOFAD)家系和1個(gè)晚發(fā)型家族性阿爾茨海默病(late-onset familial Alzheimer'sdisease,LOFAD)家系進(jìn)行PS-1基因、PS-2基因、APP基因、Tau蛋白基因的突變分析,對(duì)發(fā)現(xiàn)的新堿基位點(diǎn)改變,應(yīng)用DNA直接測序技術(shù)或限制性內(nèi)切酶酶切等技術(shù)進(jìn)行100例正常對(duì)照分析,辨別是突變還是多態(tài)。

4、　　 結(jié)果:在一家系檢測出PS-1基因一個(gè)新的堿基缺失:即第6外顯子507-509位點(diǎn)的ATC三個(gè)核苷酸缺失,導(dǎo)致所編碼的PS-1蛋白的169位絲氨酸缺失(Serl69del)。該家系中所有患者均存在此位點(diǎn)改變,而正常人群中不存在,考慮為致病突變。另一家系先證者PS-2基因編碼區(qū)1號(hào)外顯子發(fā)現(xiàn)一個(gè)同義突變(T69C),非編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)兩處堿基改變,但家系內(nèi)另一名患者未發(fā)現(xiàn)上述改變,表明這三種改變并非致病突變。攜帶Serl69del突變的患