富血小板血漿（PRP）常溫保存理化指標及PDGF-AB、TGF-β1含量變化的研究.pdf

1、目的：Marx等首次將富血小板血漿(PRP)技術(shù)引入口腔醫(yī)學領(lǐng)域，引起了國外口腔界的極大興趣和研究熱情，為口腔種植、牙周重建、口腔頜骨重建等領(lǐng)域?qū)Ω黝惤M織缺損與創(chuàng)傷的修復治療提供了新的思路，在口腔醫(yī)學臨床應(yīng)用中極具發(fā)展前景。隨著對PRP技術(shù)認識的逐步提高，應(yīng)用范圍的不斷擴大，臨床對富血小板血漿的需求量會越來越多，而只靠臨時分離制備已遠不能滿足臨床需要，探尋有效的貯存方式才是解決問題的根本途徑。目前國內(nèi)外學者對PRP保存的研究主要集中在保

2、存后血小板形態(tài)學、體外聚集功能指標及輸注后臨床止、凝血功能的改變等方面?？谇豢茟?yīng)用PRP技術(shù)主要是利用其富含高濃度的蛋白生長因子，促進組織修復與重建。目前，PRP保存對血小板形態(tài)、代謝、功能、損傷的評價及促進組織再生有效成份的各種生長因子含量變化的研究尚未見報道，是否還具有高度的促進組織修復再生能力尚待進一步研究。本實驗?zāi)康氖菑目谇慌R床醫(yī)學角度，研究PRP在20～24℃連續(xù)溫和振蕩保存三天前、后，血小板計數(shù)、WBC濃度、RBC濃度、血小

3、板平均體積、PH、氧分壓、二氧化碳分壓、乳酸脫氫酶濃度、乳酸濃度及激活狀態(tài)下PDGF．AB和TGF．p1含量的變化，評價PRP在20～24℃連續(xù)溫和振蕩保存三天后血小板形態(tài)、代謝、功能及損傷情況，探討其促進組織修復再生能力的變化。為臨床高效保存、合理利用、保證臨床治療效果及擴展PRP技術(shù)在口腔科的臨床應(yīng)用領(lǐng)域提供實驗依據(jù)。 材料及方法: 符合中華人民共和國獻血體檢標準的健康者，ACD-A抗凝靜脈血200ml，采用白膜回漿

4、法制備PRP，選擇20～24℃連續(xù)溫和振蕩保存條件，分別測定靜脈血、新鮮PRP、保存三天后PRP的血小板計數(shù)、wBC濃度、RBC濃度、血小板平均體積、PH、氧分壓、二氧化碳分壓、乳酸脫氫酶濃度、乳酸濃度、PDGF-AB和TGF-β1含量等指標。檢測PDGF-AB和TGF-β1含量前，參照臨床上應(yīng)用PRP的方法，利用牛凝血酶+10％CaCl<,2>溶液激活血小板，使之釋放生長因子進入血清進行定量分析。標本PDGF-AB和TGF-β1含量采

5、用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測。數(shù)據(jù)結(jié)果應(yīng)用SPSS 11.5軟件處理分析。 結(jié)果： 檢測指標結(jié)果：靜脈血、新鮮PRP(FPRP)、保存三天后PRP(SPRP)中PLT(×10<'9>)/L濃度分別為：160±29.09、880±279.96、850±296.89；MPV(fL)分別為：8.56±0.54、8.24±0.80、9.92±0.48；WBC(×10<'9>)/L分別為：6.5±1.19、2.6±1.99

6、、2.5±1.91：RBC(×10<'12>)/L分別為：4.6±0.76、0.028±0.023、0.025±0.02；PH值分別為：7.364±0.03、7.093±0.066、7.034±0.078；PO<,2>(mmHg)分別為：39.72±9.23、103.63±13.94、113.89±7.69：PCO<,2>(mmHg)分別為：45.50±6.12、58.95±6.85、32.7±4.92：LDH(mmol/L)分別為：1

7、80.83±32.52、231.87±36.85、352.53+61.22；LAC(mmol/L)分別為：1.40±0.23、1.58±0.28、30.18±5.1。靜脈血血清、FPRP血清、SPRP血清PDGF-AB濃度(pg/ml)分別為：1.69±0.36、56.12±11.72、58.17±12.1；TGF-β1濃度(pg/ml)分別為：56.19±14.55、331.12±64.94、365.55±73.13。計 算指

8、標結(jié)果：靜脈血PLT總數(shù)(×10<'10>)：3.7±0.66/每袋；FPRP中PLT總數(shù)(×10<'10>)：2.6±0.6/u：FPRP中WBC總數(shù)(×10<'7>)：7.3±4.93/u；FPRP中RBC總數(shù)(×10<'8>)：8.0±5.73/u(200ml靜脈血制備的PRP為一個u)；FPRP的血小板富集系數(shù)(PEF)為：5.3±1.0；血小板獲得率PRR(％)為：69.12±8.6；FPRP的PDGF-AB富集系數(shù)(PDEF

9、)為：36.94±12.44；FPRP的TGF-β1富集系數(shù)(TEF)為：6.59±2.03；SPRP的PDGF-AB保存率PDSR(％)為：104.17±11.28；SFPRP的TGF-β1保存率TSR(％)為：110.68±8.29。SPRP組與FPRP組比較：血小板計數(shù)無顯著性差異(P>0.05)；WBC濃度、RBC濃度、MPV、PH、PO<,2>、PCO<,2>、LDH、LAC有顯著性差異(P<0.05)；PDGF．AB含量無顯

10、著性差異(P>0.05)；TGF-β 1含量有顯著性差異(P<0.05)，保存后比保存前濃度增加了大約10.68％。 結(jié)論: 1、20～24℃連續(xù)溫和振蕩保存PRP的方法簡便易行，要求設(shè)備少，臨床操作簡單方便，是口腔科臨床少量應(yīng)用，短期保存PP,2P的首選方法。 2、PRP在20～24℃連續(xù)溫和振蕩保存三天前、后，血小板數(shù)量無明顯變化。理化指標改變提示血小板形態(tài)、代謝等方面發(fā)生了一定程度的變化。 3、PR