Dkk1在腫瘤診斷中的潛在應(yīng)用及其在腫瘤微環(huán)境中的作用.pdf

1、為獲得與肝細胞癌發(fā)生發(fā)展相關(guān)的基因，本室通過cDNA芯片技術(shù)比較了肝細胞癌組織及相對應(yīng)的癌旁組織基因表達差異。從有較大表達差異的基因中選取了一個在肝癌組織中高表達的基因Dkkl進行研究。進一步通過Northernblot方法，分析了Dkkl在12例肝癌組織和相對應(yīng)的癌旁組織的表達情況，結(jié)果顯示Dkkl在7例肝癌組織中有表達，而對應(yīng)的癌旁組織未檢測到Dkkl的表達。 Dkkl是一個分泌性糖蛋白，它對胚胎時期神經(jīng)的發(fā)育起重要作用，肝

2、癌發(fā)生后再次表達出來。首先，我們采用RT-PCR、熒光定量PCR、Westernblot和酶聯(lián)免疫吸附實驗在多種人惡性腫瘤細胞系中對Dkkl的表達情況進行了檢測分析。RT一PCR、熒光定量PCR、Westernblot均能在10種不同腫瘤類型的人惡性腫瘤細胞系檢測到Dkkl的存在。進一步用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測到Dkkl蛋白在19種人惡性腫瘤細胞系的培養(yǎng)上清中有表達，蛋白表達量波動于5ng/ml～210ng/ml之間。 目前，診斷

3、和篩選肝細胞癌的主要方法是通過超聲影像和血清AFP檢測。那么Dkkl是否可以作為一個肝癌的腫瘤標志物呢?我們應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測了18例正常人、14例肝硬化病人、128例肝癌病人血清中Dkkl的濃度。結(jié)果顯示Dkkl在部分肝細胞癌病人血清中有較高表達，但各組間無統(tǒng)計學差異。統(tǒng)計學無差異可能與樣本量少，變異性大有關(guān)。 Dkkl作為Wnt通路的一個抑制性蛋白在肝癌組織中高表達，提示該蛋白在肝癌發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮著重要作用。通過在