SOCE通道在CAPRI膜轉(zhuǎn)位過(guò)程中作用的研究.pdf

1、CAPRI是GAPIP4BP家族的成員之一,具有針對(duì)小G蛋白R(shí)as、Rap的特異性GAP(GTPase-Activating Protein)活性。CAPRI蛋白內(nèi)含C2A、C2B、GRD、PH/Btk四個(gè)結(jié)構(gòu)域,其中C2A-C2B結(jié)構(gòu)域具有鈣離子結(jié)合能力,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)鈣離子濃度上升時(shí)C2A-C2B結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)CAPRI的膜轉(zhuǎn)位;GRD為CAPRI功能結(jié)構(gòu)域,具有RasGAP與RapGAP酶活性,可以使小G蛋白由GTP結(jié)合形式水解為GDP結(jié)合

2、形式,從而使小G蛋白失活?，F(xiàn)有的研究結(jié)果表明:當(dāng)細(xì)胞在ATP、Histamine的刺激下,CAPRI從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)位至細(xì)胞膜,并激活CAPRI的RasGAP與RapGAP活性。但是在不同的細(xì)胞中,GFP-CAPRI的膜轉(zhuǎn)位存在差異,例如HeLa細(xì)胞膜中,GFP-CAPRI有較明顯的半衰期,而HEK293細(xì)胞膜上觀察不到這種現(xiàn)象。本研究旨在探討在HEK293細(xì)胞中毒胡蘿卜素(Tg)是否可以引起GFP-CAPRI的膜轉(zhuǎn)位以及GFP-CAPRI膜

3、轉(zhuǎn)位與SOC通道之間的關(guān)系。研究結(jié)果顯示,毒胡蘿卜素(Tg)刺激HEK293細(xì)胞時(shí)誘導(dǎo)的SOCE參與CAPRI的膜轉(zhuǎn)位。SOCE通道非特異阻滯劑2-APB,Gd3+以及使用sh-STIM1敲除內(nèi)源性STIM1表達(dá)時(shí),均明顯減弱Tg誘導(dǎo)的GFP-CAPRI膜轉(zhuǎn)位,STIM1持續(xù)活化突變體(constitutive active)STIM1D76A即使不用毒胡蘿卜素(Tg)刺激,亦可引起GFP-CAPRI膜轉(zhuǎn)位。同時(shí),在原代星型膠質(zhì)細(xì)胞中,