復(fù)方丹參片血清藥物化學(xué)及代謝組學(xué)研究.pdf

1、復(fù)方丹參片是由丹參（Radix Salviae Miltiorrhizae）、三七（Radix Notoginseng）和冰片（Borneolum Syntheticum）三味中藥制成的現(xiàn)代中藥制劑，收載于2005版中華人民共和國(guó)藥典第一部，具有活血化瘀、理氣止痛之功效。自20世紀(jì)70年代問世以來(lái)，復(fù)方丹參片在治療心血管疾病方面取得了顯著的成效，被廣泛用來(lái)治療心肌梗死和冠心病。臨床上，關(guān)于復(fù)方丹參片改善心臟功能的機(jī)制可謂是眾說(shuō)紛紜，包括

2、降低血中脂質(zhì)、抑制血栓形成等。到目前為止，還沒有任何一個(gè)研究能夠系統(tǒng)地闡釋復(fù)方丹參片的作用機(jī)制。另外，值得注意的是復(fù)方丹參片中化學(xué)成分眾多，但并非所有的成分都是有效成分。在藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不夠明確的情況下，中藥復(fù)方作用機(jī)制的研究確實(shí)很難取得實(shí)質(zhì)性的進(jìn)展。因此，本文旨在揭示復(fù)方丹參片藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的前提下繼續(xù)深入研究其治療心肌缺血的作用機(jī)制。
　　 眾所周知，中藥復(fù)方是在病證結(jié)合、方證對(duì)應(yīng)、理法方藥一致的條件下，通過多組分作用在多靶點(diǎn)，

3、融拮抗、補(bǔ)充、整合、調(diào)節(jié)等多種功效于一體而起到治療作用。由此可見，中藥復(fù)方的藥效作用十分注重系統(tǒng)性和整體性。所以，對(duì)中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制的研究也應(yīng)從整體入手。在眾多的研究方法中，血清藥物化學(xué)和代謝組學(xué)都十分注重整體的研究，這與中醫(yī)的整體觀思維不謀而合：血清藥物化學(xué)方法通過分析給藥后血清中的藥物移行成分，研究有效成分在體內(nèi)的吸收、代謝情況，用以闡明藥物的整體體內(nèi)過程；代謝組學(xué)方法通過分析內(nèi)源性代謝物群的改變，判別機(jī)體代謝網(wǎng)絡(luò)所處的狀

4、態(tài)，用于疾病診斷和藥物作用機(jī)制的研究。
　　 在血清藥物化學(xué)和代謝組學(xué)兩大理論的指導(dǎo)下，本文采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜等分析方法，通過整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，對(duì)復(fù)方丹參片藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其治療心肌缺血的作用機(jī)制進(jìn)行了較系統(tǒng)的研究。主要研究?jī)?nèi)容如下：
　　 1）在血清藥物化學(xué)理論指導(dǎo)下，利用快速液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間質(zhì)譜（RRLC-Q-TOF/MS），檢測(cè)復(fù)方丹參片的入血成分和代謝產(chǎn)物，即通過比較給藥前后大鼠的代謝指紋圖譜，尋找并鑒定給

5、藥后血清中新出現(xiàn)的化學(xué)成分。
　　 2）在代謝組學(xué)理論指導(dǎo)下，利用超高壓液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時(shí)間白質(zhì)譜（UPLC-Q-TOF/MS），鑒定心肌缺血的生物標(biāo)志物，即通過比較造模前后大鼠的代謝指紋圖譜，尋找并鑒定造模后呈現(xiàn)特征性改變的內(nèi)源性代謝物。
　　 3）在心肌缺血模型代謝組學(xué)研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步研究常見五種常見西藥（異硝酸山梨酯，普奈洛爾，維拉帕米，卡托普利，曲美他嗪）與中藥（復(fù)方丹參片及其有效成分）對(duì)心肌缺血大鼠的

6、保護(hù)作用，通過中西藥對(duì)比的方式，初步闡釋了復(fù)方丹參片及其有效成分（丹參酮ⅡA、丹參酚酸B）治療心肌缺血的作用機(jī)制。
　　 通過上述研究，本文在給藥大鼠血清中檢測(cè)到復(fù)方丹參片的14個(gè)原型成分和8個(gè)代謝產(chǎn)物，其中丹參醛、丹參新醌B、丹參素的糖結(jié)合物（M1）和丹參新醌B的甲基化產(chǎn)物（M8）等是利用LC-MS方法首次在大鼠體內(nèi)檢測(cè)到；在心肌缺血大鼠血漿中發(fā)現(xiàn)并最終鑒定了與疾病相關(guān)的22生物標(biāo)志物，其中7個(gè)標(biāo)志物同時(shí)出現(xiàn)在嘌呤代謝途徑中，