低氧時(shí)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞S100A4表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞效應(yīng)的研究.pdf

1、目的：探討低氧條件下肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞JAKs/STATs信號(hào)通路及HIF-1α表達(dá)對(duì)S100A4和細(xì)胞增殖的影響。
　　 方法：應(yīng)用免疫熒光和激光共聚焦顯微鏡的方法觀察細(xì)胞的形態(tài)和變化；應(yīng)用Real-time PCR方法觀察細(xì)胞S100A4等mRNA的表達(dá)水平；應(yīng)用Western blotting方法研究S100A4等蛋白的表達(dá)狀況；應(yīng)用STAT3 siRNA、HIF-1α siRNA轉(zhuǎn)染等方法觀察HIF-1α、STAT3對(duì)細(xì)胞

2、表達(dá)S100A4的影響，以及對(duì)細(xì)胞形態(tài)和增殖的效應(yīng)。
　　 結(jié)果：在低氧條件下，S100A4主要在R-PASMCs的細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞核中表達(dá)，S100A4表達(dá)增高；IL-6、HIF-1α、磷酸化JAK2和STAT3蛋白表達(dá)均增高。IL-6抗體、S100A4特異性阻滯劑NSC95397、STAT3 siRNA可抑制S100A4表達(dá)與R-PASMCs的增殖。與單獨(dú)低氧組相比較，HIF-1α siRNA、IL-6抗體、S100A4特異性阻

3、滯劑NSC95397預(yù)處理組中，S100A4、磷酸化JAK2與STAT3蛋白表達(dá)均降低；但是與低氧組相比較，HIF-1α，siRNA、IL-6抗體、S100A4特異性阻滯劑NSC95397預(yù)處理組，HIF-1α在PASMCs中無(wú)顯著變化。此外，免疫熒光顯示S100A4蛋白主要在低氧刺激下的R-PASMCs中表達(dá)。HIF-1α siRNA、IL-6抗體、S100A4特異性阻滯劑NSC95397預(yù)處理組，均能抑制低氧誘導(dǎo)的PASMCs增殖。