16S rDNA T-RFLP快速分析慢性腹瀉患者腸道菌群及其應(yīng)用研究.pdf

1、 本研究篩選出一對通用引物，再配合使用毛細管電泳技術(shù)應(yīng)用于腸道菌群檢測，目的是使一次實驗在一個混合樣品中能同時檢測出多種細菌，有助于快速分析腸道復(fù)雜菌群的結(jié)構(gòu)。方法是其中一個引物5'末端用6-FAM進行熒光標記，而另一個引物不進行標記?！?本實驗應(yīng)用該法對30例慢性腹瀉患者和22例健康人進行腸道菌群分析，從而探討菌群變化情況。經(jīng)過分析后發(fā)現(xiàn)，健康人腸道菌群中以厭氧菌為主，這與20世紀60年代中期以前的說法不同，當時由于厭氧菌技

2、術(shù)不完善，過去被認為是主要優(yōu)勢菌的大腸桿菌，在實際上為少數(shù)，居于次要地位。結(jié)腸內(nèi)寄生的優(yōu)勢菌種均能夠同時被檢測出來。該法能夠?qū)θ梭w腸道菌群進行定性和定量分析，30例慢性腹瀉患者均未發(fā)現(xiàn)特異的病原菌，而優(yōu)勢菌群的種類和比例均發(fā)生了改變，提示發(fā)生了腸道菌群紊亂。因此我們建議對不明原因的腹瀉要及時對腸道菌群進行監(jiān)測，動態(tài)觀察，避免抗生素的盲目使用，有效避免耐藥菌株的產(chǎn)生。 本文證實：利用16SrDNA基因建立的末端限制性酶切片段長度多