利用16S rDNA測(cè)序技術(shù)分析腹瀉仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)特征及灌服糞腸球菌對(duì)其調(diào)節(jié)作用.pdf

1、腸道微生物與機(jī)體的健康息息相關(guān)。仔豬在哺乳期因生理缺陷、外界環(huán)境壓力、食物變化等原因常導(dǎo)致腸道菌群紊亂，發(fā)生腹瀉。腹瀉同樣會(huì)加劇腸道微生物的紊亂，生產(chǎn)性能下降，并造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。有研究表明宿主的腸道微生物與性別相關(guān)，但也一些截然相反的結(jié)果。微生態(tài)制劑作為一種理想的抗生素替代品常用來調(diào)節(jié)豬腸道微生物平衡，預(yù)防和治療仔豬腹瀉。本文利用16S rDNA技術(shù)分析腹瀉仔豬腸道菌群結(jié)構(gòu)特征及灌服微生態(tài)制劑對(duì)仔豬腸道微生物的內(nèi)在影響及其性別差異。<

2、br>　　本實(shí)驗(yàn)選擇胎次、產(chǎn)期、產(chǎn)仔數(shù)相近的新生仔豬48窩，觀察仔豬群健康狀況，一旦發(fā)現(xiàn)某窩仔豬發(fā)生腹瀉，立即選擇該窩腹瀉仔豬1頭及同窩同性別未腹瀉的仔豬1頭采集血樣、糞樣，直至采集20窩仔豬樣，并將這20窩仔豬隨機(jī)分對(duì)照組(C)、試驗(yàn)組1(T1)、試驗(yàn)組2(T2)、試驗(yàn)組3(T3)、試驗(yàn)組4(T4)、每組4窩。五個(gè)組于腹瀉當(dāng)日(0d)、第3日(3d)、第6日(6d)全窩分別灌服雙蒸水1mL(C)、糞腸球菌2.5×108 CFU/mL(

3、T1)、5×108 CFU/mL(T2)、1×109 CFU/mL(T3)、2×109 CFU/mL(T4)的微生態(tài)制劑1mL。到20日齡時(shí)，每窩選擇試驗(yàn)期間發(fā)生過腹瀉與同性別從未腹瀉的仔豬各一頭采集血液樣品和糞樣。試驗(yàn)分為兩個(gè)部分:
　　1腹瀉仔豬腸道微生物、免疫指標(biāo)的情況
　　本實(shí)驗(yàn)利用16S rDNA技術(shù)分析腹瀉仔豬腸道微生物特征及其性別差異。結(jié)果表明:腹瀉仔豬與未腹瀉仔豬腸道微生物多樣性沒有差異，但在門水平上，腹瀉組

4、疣微菌門Verrucomicrobia(P=0.0419)的豐度顯著高于未腹瀉組;在屬水平上，腹瀉組消化鏈球菌屬Peptostreptococcus（P=0.0195）的豐度顯著高于未腹瀉組，而叢毛單胞菌屬Comamonas(P=0.0308)和Peptoniphilus(P=0.0243)的豐度顯著低于未腹瀉組;公仔豬組中Butyricimonas(P=0.0019)、Sharpea(P=0.0049)和Akkermansia（P=0

5、.0168）的豐度顯著顯著高于母仔豬組。腹瀉仔豬血液中免疫球蛋白M(IgM)濃度顯著低于未腹瀉仔豬組(P=0.049)。
　　2灌服糞腸球菌微生態(tài)制劑對(duì)仔豬腸道微生物、免疫指標(biāo)的影響
　　參考本實(shí)驗(yàn)室前期關(guān)于糞腸球菌微生態(tài)制劑對(duì)仔豬腹瀉、血液指標(biāo)及生長(zhǎng)性能影響的研究結(jié)果，挑選對(duì)照組(C)、試驗(yàn)組2(T2)、試驗(yàn)組4(T4)中同單元、同性別仔豬各6頭，用以研究灌服糞腸球菌微生態(tài)制劑對(duì)仔豬腸道微生物的影響。結(jié)果表明，灌服糞腸球菌

6、微生態(tài)制劑有治療腹瀉的功效，但沒有改變仔豬腸道微生物的多樣性和豐度。與對(duì)照組相比，灌服微生態(tài)制劑顯著提高血液中IgA(P=0.0250)、IgM(P=0.0402)的濃度。此外，通過兩個(gè)時(shí)間段對(duì)照組腸遭微生物的比較，我們發(fā)現(xiàn)仔豬腸道微生物的多樣性和豐度隨日齡改變;在門水平，3-7日齡組梭桿菌門Fusobacteria(P=0.015)的豐度顯著低于20日齡組，但螺旋體門Spirochaetes(P=0.045)和纖維桿菌門Fibroba