高碘對(duì)大鼠凝血功能及下腔靜脈血管內(nèi)皮形態(tài)的影響.pdf

1、【目的】
　　 本實(shí)驗(yàn)通過給大鼠喂以偏食和高碘水，建立偏食高碘大鼠模型，綜合運(yùn)用凝血指標(biāo)的測(cè)定、血漿中HCY的測(cè)定、大鼠下腔靜脈肝段的HE染色及相關(guān)因子免疫組化觀察，觀察不同濃度的高碘對(duì)大鼠凝血功能的作用及高碘對(duì)大鼠下腔靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)的影響，并探討高碘對(duì)大鼠凝血功能和血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用機(jī)制。
　　 【方法】
　　 1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組：選用斷乳后1個(gè)月左右，體重100-120g遠(yuǎn)交封閉群的Wistar大鼠（購(gòu)

2、自山東大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，屬SPF/VAF級(jí)動(dòng)物），根據(jù)體重和性別隨機(jī)分為8組，次序?yàn)椋孩僬?duì)照組：正常飼料+正常水組；②正常飼料+10倍碘組；③正常飼料+50倍碘組；④正常飼料+100倍碘組；⑤偏食對(duì)照組：偏食飼料+正常水組。⑥偏食飼料+10倍碘組；⑦偏食飼料+50倍碘組；⑧偏食飼料+100倍碘組，每組8只。
　　 2。記錄大鼠體重?cái)?shù)據(jù)：以上各組動(dòng)物每周稱量體重，記錄。喂養(yǎng)6個(gè)月。
　　 3.各項(xiàng)凝血指標(biāo)測(cè)定：用乙醚麻

3、醉后，枸櫞酸鈉抗凝管通過眼球靜脈取血，離心分離血漿后，用CA7000全自動(dòng)凝血分析儀，測(cè)定凝血酶原時(shí)間(PT-time)、凝血酶原時(shí)間國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化比值(PT-INR)、活化部分凝血酶原時(shí)間(APTT-time)、纖維蛋白原時(shí)間(Fbg-time)、纖維蛋白原濃度(Fbg-c)、凝血酶時(shí)間(TT)、抗凝血酶Ⅲ活性(AT3；A)和D-二聚體(D-dimer)。
　　 4。測(cè)定各組大鼠血液HCY的含量。
　　 5.大鼠下腔靜脈H

4、E染色：取用10％福爾馬林固定的大鼠下腔靜脈，常規(guī)石蠟包埋，切片，常規(guī)用二甲苯脫蠟，經(jīng)各級(jí)乙醇至水，蘇木素染色5min，自來(lái)水沖洗。鹽酸乙醇分化30s。自來(lái)水浸泡15min。常規(guī)脫水，透明，封片，觀察其內(nèi)皮細(xì)胞的變化。
　　 6.大鼠下腔靜脈免疫組織化學(xué)：組織切片通過脫蠟和水化，抗原修復(fù)后，PBS沖洗，滴加一抗、二抗，進(jìn)行DAB顯色，觀察ET-1、ICAM-1在下腔靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞中的表達(dá)。
　　 【結(jié)果】
　　

5、 1.大鼠體重的變化干預(yù)2、4、6個(gè)月時(shí)，各正常飼料+高碘飲水組的大鼠體重與NI組大鼠相比無(wú)明顯差別；偏食對(duì)照組(BNI)直到第6個(gè)月體重才與NI組顯出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；干預(yù)2、4、6個(gè)月時(shí)，各偏食飼料+高碘飲水組大鼠體重均明顯低于NI組。
　　 2，大鼠各項(xiàng)凝血指標(biāo)各正常飼料+高碘飲水組的大鼠與正常對(duì)照組相比，10HI組的大鼠的各指標(biāo)PT-Time、PT-INR、Fbg-Time、APTT、TT和AT3％數(shù)值降低，纖維蛋白原濃度(F

6、bg-c)數(shù)值升高，差異顯著(PT、PT-INR、Fbg-Time、AT3％:p＜0.05,TT、APTT、Fbg-c:p＜0.01)：而50HI和100HI組的大鼠PT-Time、PT-INR、Fbg-Time、TT和APTT數(shù)值升高，纖維蛋白原濃度(Fbg-c)數(shù)值降低(除50HI的Fbg-Time、TT、Fbg-c:p＜0.05,50HI、100HI兩組的其它指標(biāo)均p＜0.01)（見表1）。DD各組無(wú)明顯差異。各偏食對(duì)照組與正常對(duì)

7、照組相比，B10HI組的大鼠PT-Time、PT-INR、Fbg-Time、APTT、TT和AT3％數(shù)值降低，纖維蛋白原濃度(Fbg-c)數(shù)值升高（除APTTp＜0.01外，其余各項(xiàng)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義）而BNI、B50HI和B100HI組的大鼠PT-Time、PT-INR、Fbg-Time、TT和APTT數(shù)值升高，纖維蛋白原濃度(Fbg-c)數(shù)值降低。（除B50HI組的TT無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余的數(shù)值P＜0.01）。各偏食對(duì)照組與各正常飼料+高

8、碘飲水組的大鼠相比，凝血功能降低。
　　 3.高碘組大鼠的內(nèi)皮細(xì)胞功能受到了一定影響，HCY含量發(fā)生了變化：隨著碘濃度的逐漸升高，HCY的含量逐漸升高。與正常對(duì)照組(NI)相比，10HI組，50HI組，100HI組，B10HI組，B50HI組，B100HI組的HCY含量升高差異顯著(除了10HI組數(shù)值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余各組p＜0.01)
　　 4.高碘組內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)發(fā)生了變化，隨著碘濃度的逐漸升高，大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

9、出現(xiàn)增生現(xiàn)象，偏食組比正常飼料組明顯。
　　 5.大鼠下腔靜脈免疫組化結(jié)果顯示，高碘組下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的ET-1, ICAM-1達(dá)顯著增加，偏食組比正常飼料組明顯。而正常對(duì)照組表達(dá)較弱。
　　 【結(jié)論】
　　 1。本研究提示高碘對(duì)大鼠凝血功能有促進(jìn)和降低的雙重作用，這種作用與碘的劑量有關(guān)。適量的高碘促進(jìn)凝血功能，但隨著碘濃度的升高表現(xiàn)出降低凝血功能的作用。偏食能降低大鼠凝血功能。
　　 2.形態(tài)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)