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文檔簡介
1、目的:觀察人腫瘤壞死因子-α(TNF-α)對人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞(EA.hy926)結(jié)構(gòu)和功能的影響,并初步探討其作用機制。
方法:培養(yǎng)人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞EA.hy926,分組加入1、10、100ng/mlTNF-α培養(yǎng)24h,或加入100ng/mlTNF-α培養(yǎng)3、8、12、24 h,采用蛋白質(zhì)免疫印跡法(Western blotting)檢測細胞中血管擴張刺激磷蛋白(VASP)的表達水平;采用實時熒光定量PCR(Real
2、-time PCR)檢測細胞中VASPmRNA的表達水平,采用流式細胞儀檢測細胞凋亡,采用透射電子顯微鏡觀察細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。
結(jié)果:與空白對照組比較,TNF-α引起血管內(nèi)皮細胞VASP蛋白和mRN A的表達水平下降,呈時間和劑量依賴性;隨著TNF-α作用時間的延長或作用濃度的增加,細胞受損程度增加,并且可以觀察到細胞凋亡比率增加。
結(jié)論:TNF-α通過破壞血管內(nèi)皮細胞結(jié)構(gòu)和功能導致血管內(nèi)皮細胞通透性增高,呈時間與
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