SelS對腫瘤壞死因子-α誘導的血管鈣化的影響.pdf

1、血管鈣化是動脈粥樣硬化、糖尿病、慢性腎病等多種疾病的病理特征。血管鈣化形成的一個中心環(huán)節(jié)就是血管平滑肌細胞(VSMCs)向成骨細胞分化。炎癥細胞因子如腫瘤壞死因子-α(TNF-α)能誘導VSMCs向成骨細胞分化,促進血管鈣化。硒是哺乳動物所必需的一種微量元素,它在生物體中以硒蛋白的形式發(fā)揮生理作用。SelS是硒蛋白家族中的一員,已有研究表明,SelS能夠參與炎癥調(diào)節(jié)。我們采用?-甘油磷酸鈉誘導VSMCs體外鈣化,初步探究了SelS、炎癥

2、、血管鈣化之間的關系,取得了如下結果:
　　1.通過RT-PCR和蛋白質(zhì)印跡技術初步探索了大鼠SelS基因的有效沉默片段。經(jīng)過大量的實驗探索,初步的結論為:在所設計的五條siRNA片段中,編號為siRNA-148沉默效果最佳,其序列為:Sense:5’-GCGUCCUUCUCUACAUUGUTT-3’;Antisense:5’-ACAAUGUAGAGAAGGACGCTT-3’。
　　2.初步數(shù)據(jù)顯示,SelS沉默后,鈣化的V

3、SMCs的ALP活性降低,鈣化標志蛋白cbfa-1、ColI基因表達下降,但基質(zhì)鈣沉積增加。這些結果表明SelS可能有抑制血管鈣化的作用,但其作用機理有待進一步研究。
　　3.與先前文獻報道一致,我們研究發(fā)現(xiàn),TNF-α能夠增強鈣化VSMCs中ALP活性及cbfal的表達,表明TNF-α在體外促進VSMCs向成骨細胞分化。
　　4.用siRNA-148片段使SelS基因沉默后,TNF-α促進VSMCs向成骨細胞分化作用減弱,

4、表現(xiàn)為ALP活性及cbfal的表達均顯著下降。但是,通過對基質(zhì)鈣含量的測定發(fā)現(xiàn),SelS基因沉默使TNF-α促進鈣化的能力進一步增加,表明SelS可以抑制TNF-α誘導的鈣化。這只是初步結果,還需要大量的實驗進一步證實。
　　5.將鈣化的VSMCs用亞硒酸鈉預處理24h,再用TNF-α作用細胞。發(fā)現(xiàn)亞硒酸鈉能夠抑制TNF-α誘導的ALP活性的增強,并且100nmol/L的亞硒酸鈉效果最為顯著。這表明亞硒酸鈉可能能夠抑制TNF-α誘