尼美舒利對氯化鈷誘導的人胃癌細胞HIF-1a、VEGF表達的抑制作用和機制研究.pdf

1、鄭州大學博士學位論文尼美舒利對氯化鈷誘導的人胃癌細胞HIF1a、VEGF表達的抑制作用和機制研究姓名：馮玉光申請學位級別：博士專業(yè)：內科學（消化）指導教師：李建生20050510型＆絲!堂堂堅絲星簍捌幽塑墜宣幽墮墅：!!：坐塑!塑堂幽型墮豎能是體內腫瘤COX。2常與VEGF共表達的重要原因之一。前列腺素E2(prostaglandinE2，PGE2)是COX2催化反應的主要終產物之一，是血管生成的刺激因子，在多種細胞類型PGE2增自HV

2、EGF表達。推測低氧誘導的COX一2、PGE2表達升高參與了低氧誘導的血管生成。COX2抑制劑抑制腫瘤VEGF表達及血管生成以及PGE2誘導VEGF表達的確切機制尚不完全清楚。最近有學者在前列腺癌細胞株和結腸腺癌細胞株的研究表明COX一2的主要代謝產物PGE2通過相應信號轉導途徑誘導H1F1a蛋白水平升高，進而促進VEGF表達，提示在體內腫瘤低氧微環(huán)境Tcox一2抑制刺可能通過抑制PGE2的產牛抑制腫l富HIF1、ⅦGF表達和血管生成。

3、但是，在不同的細胞系，也有學者發(fā)現(xiàn)cOx一2一PGE2：途徑與H1F1ⅡVEGF途徑之間無關，提示信號轉導調節(jié)網絡是復雜的，在不同的細胞類型之間存在差異性。鑒于體內腫瘤存在低氧區(qū)以及低氧誘導HIF一1a和VEGF表達是腫瘤血管生成的重要原因，COX一2及其催化產物PGE2在腫瘤血管生成中也發(fā)揮重要作用，有必要進～步研究低氧情況下COX一2PGE2信號途徑與HIF1Ⅱ及VEGF信號途徑之間的關系。木研究擬探討選擇性COX一2抑制劑尼美舒利

4、對低氧模擬劑氯化鈷誘導的人胃腺癌BGC一823細胞表達HIF1a、VEGF的抑制作用，闡明COX一2及其主要催化產物PGE2在這種作用中扮演的角色，并進一步分別應用促細胞分裂原活化蛋白激酶(MitogenActivatedProteinKinase，MAPK)阻滯劑PD98059和磷酸肌醇3激酶(phosphatidylinositol3kinase，P13K)阻滯荊wortmannin研究PGE2i5秀導H1F一1a、VEGF表達的信

5、號轉導途徑。研究分為以下三部分：第一部分低氧模擬劑氯化鈷誘導人胃腺癌BGC一823細胞COX一2、HlF一1n、VEGF表達的研究方法1細胞培養(yǎng)及低氧誘導和實驗分組細胞生長至60％～70％融合度后，01％FCS的RPMl1640培養(yǎng)基行細胞同步化24h后，分別加入含或不含低氧模擬劑氯化鈷(150HM1的0I％FCSRPMI1640培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)3、12、24h后收集細胞。2總RNA提取和RTPCR檢測氯化鈷對BGC一823細胞COX一