三氧化二砷對(duì)人膽管癌細(xì)胞系QBC939的生長(zhǎng)抑制及促凋亡作用.pdf

1、第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文三氧化二砷對(duì)人膽管癌細(xì)胞系QBC939的生長(zhǎng)抑制及促凋亡作用姓名：王光哲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：竇科峰20020101三氧化二砷對(duì)人膽管癌細(xì)胞系QBc939的生長(zhǎng)抑制及促凋亡作用研究生王光哲導(dǎo)師竇科峰教授摘要膽管細(xì)胞癌是一種生長(zhǎng)緩慢的消化道惡性腫瘤，惡性程度高，早期診斷率低，目前手術(shù)、化療、放療的療效均不理想，預(yù)后較差。三氧化二砷(Arsenictrioxide，As203)是一種廣泛存在于自然界

2、的毒性化合物，在我國(guó)古代就用于治療牛皮癬梅毒等疾病，近年來(lái)As203已被成功應(yīng)用于白血病的治療。文獻(xiàn)報(bào)道，As203對(duì)多種腫瘤細(xì)胞具有增殖抑制及促凋亡作用，但其對(duì)人膽管細(xì)胞癌的作用，國(guó)內(nèi)外尚未見報(bào)道。目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察三氧化二砷在體外對(duì)人膽管癌細(xì)胞QBc939的生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)凋亡的作用，探討其對(duì)人膽管癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響及其抗癌機(jī)制。方法實(shí)驗(yàn)設(shè)空白對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組，體外培養(yǎng)的人膽管癌細(xì)胞QBc939經(jīng)復(fù)蘇后，接種于96孔板分組培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞

3、用含不同濃度Asz03培養(yǎng)液培養(yǎng)，空白對(duì)照組用不加As203培養(yǎng)液培養(yǎng)。以下述方法檢測(cè)：(1)臺(tái)盼藍(lán)染色：每日取出一組對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞，臺(tái)盼藍(lán)染色后，于細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，1w后繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。(2)MTT實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組細(xì)胞分別于培養(yǎng)不同時(shí)間后終止實(shí)驗(yàn)，終止實(shí)驗(yàn)前4h每L加入20ulMTT，細(xì)胞染色后以150ulDMs0溶解，酶聯(lián)免疫儀檢測(cè)(波長(zhǎng)490nm)各孔的吸光值，計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率。(3)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察：在培養(yǎng)狀態(tài)下，用倒