ErbB4受體對人膽管細胞癌QBC939細胞系增殖與轉移的影響.pdf

1、本文主要從以下幾個部分展開論述：
　　第一部分 ErbB4在人類膽管癌QBC939細胞系中的表達
　　目的:研究ErbB4受體在人膽管癌QBC939細胞系細胞中的表達情況。
　　方法:體外培養(yǎng)人膽管癌QBC939細胞系細胞，免疫熒光法檢測ErbB4在膽管癌細胞中的表達情況。
　　結果:膽管癌QBC939細胞系中表達ErbB4蛋白。
　　結論:人膽管癌QBC939細胞中表達人類第4表皮生長因子受體(ErBb4

2、)。證明本課題組選用QBC939細胞系來進行后續(xù)體外實驗的可行性。
　　第二部分 阻斷ErbB4受體對膽管癌QBC939細胞系細胞的增殖、遷移及侵襲的影響
　　目的:考察經(jīng)AG1478特異性抑制劑阻斷ErbB4受體對人膽管癌QBC939細胞的增殖、遷移和侵襲能力的影響。
　　方法:分別加入終濃度為0μmol/L，1μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，75μmol/L，10

3、0μmol/L的AG1478阻斷膽管癌細胞ErbB4受體，使用CCK-8法測量各組膽管癌細胞增殖情況，并利用SPSS軟件計算AG1478對人膽管癌QBC939細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50值)。分別使用0μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，75μmol/L AG1478阻斷膽管癌細胞ErbB4受體，使用劃痕實驗檢測各組膽管癌細胞遷移能力的變化。分別使用0μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，75μmol/L濃度A

4、G1478阻斷膽管癌細胞ErbB4受體，使用Transwell小室法實驗檢測各組膽管癌細胞侵襲能力的變化。
　　結果: AG1478以濃度依賴方式抑制QBC939細胞增殖，計算其IC50值為:49.14μmol/L。AG1478抑制ErbB4受體后，膽管癌QBC939細胞的遷移、侵襲能力減弱。
　　結論:ErbB4抑制劑能在體外抑制人類膽管癌QBC939細胞增殖、遷移與侵襲。
　　第三部分 抑制ErbB4受體能下調iN

5、OS表達
　　目的:研究ErbB4受體實現(xiàn)其腫瘤生物學功能可能的涉及的分子機制。
　　方法:使用50μmol/L濃度阻斷ErbB4受體，使用免疫蛋白印跡法測量阻斷前后細胞裂解液中iNOS含量，比較阻斷膽管癌細胞ErbB4受體能否抑制iNOS表達。分別使用濃度0μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，75μmol/L的AG1478阻斷膽管癌細胞ErbB4受體，使用總一氧化氮檢測試劑盒檢測細胞培養(yǎng)液中NO含量變化。分別

6、使用濃度0μmol/L，25μmol/L，50μmol/L，75μmol/L的AG1478阻斷膽管癌細胞ErbB4受體，使用ELISA法檢測細胞培養(yǎng)液中VEGF含量變化。
　　結果:AG1478抑制ErbB4受體后，膽管癌QBC939細胞裂解液中iNOS含量減少。AG1478抑制ErbB4受體后，膽管癌QBC939細胞培養(yǎng)上清液中NO、VEGF含量減少，間接反映iNOS表達減少。
　　結論:ErbB4抑制劑能在體外抑制人類膽