腦缺血耐受及骨髓動員對腦缺血的影響.pdf

1、目的：探討小鼠腦缺血耐受預(yù)處理不同時間劑量以及誘導(dǎo)腦缺血耐受產(chǎn)生的不同時間窗,確立最佳耐受時間劑量和誘導(dǎo)時間窗;觀察毛冬青總黃酮等中藥成分對小鼠腦缺血耐受的影響,篩選具有增強腦缺血耐受作用的中藥成分;探討毛冬青總黃酮提高骨髓干細胞動員對大鼠腦缺血再灌注損傷的保護作用。
　　方法：1、采用兩次結(jié)扎小鼠雙側(cè)頸總動脈方法造腦缺血耐受模型,通過觀察不同預(yù)處理時間劑量下小鼠腦組織形態(tài)的變化,確定小鼠腦缺血耐受最佳時間劑量。
　　2、采

2、用兩次結(jié)扎小鼠雙側(cè)頸總動脈方法造腦缺血耐受模型,通過觀察不同預(yù)處理誘導(dǎo)時間窗下小鼠腦組織形態(tài)的變化,確立小鼠腦缺血耐受最佳誘導(dǎo)時間窗。
　　3、采用兩次結(jié)扎小鼠雙側(cè)頸總動脈方法造腦缺血耐受模型,通過觀察毛冬青總黃酮等中藥成分在最佳耐受時間劑量、誘導(dǎo)時間窗下對小鼠腦組織形態(tài)的變化,篩選出具有增強腦缺血耐受作用的中藥成分。
　　4、采用稍加改良線栓法制作大鼠腦缺血再灌注模型,應(yīng)用粒細胞集落刺激因子(G-GSF)刺激自體骨髓干細胞

3、分裂增殖,并用5-溴脫氧尿核苷(Brdu)標記。觀察大鼠腦組織HE染色、尼氏染色,免疫組化檢測CD34和Brdu陽性細胞,免疫組化法檢測Bcl-2、Bax蛋白表達。
　　結(jié)果：1、對小鼠腦缺血耐受不同時間劑量的影響預(yù)缺血10min+再次缺血30min組時間劑量較其他實驗組能顯著提高腦缺血時腦神經(jīng)細胞的耐受作用(P<0.01)。
　　2、對誘導(dǎo)小鼠腦缺血耐受產(chǎn)生的不同時間窗的影響120h組的誘導(dǎo)時間窗較其他實驗組能顯著提高腦缺

4、血時腦神經(jīng)細胞的耐受作用(P<0.01)。
　　3、不同中藥成分對小鼠腦缺血耐受的影響與模型組相比,養(yǎng)血清腦顆粒組、毛冬青總黃酮小劑量組、柿葉黃酮大、中劑量組、生姜揮發(fā)油大、中劑量組、川芎嗪注射液大劑量組、燈盞花素注射液大劑量組能顯著增強腦缺血耐受(P<0.01)。
　　4、動員自體骨髓干細胞對大鼠腦缺血再灌注損傷的影響與模型組(非動員組)相比,毛冬青總黃酮大、中劑量組、動員組對腦缺血時腦組織神經(jīng)細胞的損傷的保護作用顯著(P

5、<0.01),毛冬青總黃酮小劑量對腦缺血時腦神經(jīng)細胞的損傷的保護作用顯著或明顯(P<0.01或P<0.05);毛冬青總黃酮大劑量組Bax蛋白表達有顯著的統(tǒng)計意義(P<0.01),動員組Bax蛋白表達有明顯的統(tǒng)計意義(P<0.05);動員組、毛冬青總黃酮大劑量組Bcl-2蛋白表達明顯增強(P<0.05);毛冬青總黃酮大劑量組CD34陽性細胞表達明顯增強(P<0.05);毛冬青總黃酮大、中、小劑量組Brdu陽性細胞表達顯著增強(P<0.01

6、),動員組Brdu陽性細胞表達明顯增強(P<0.05)。
　　結(jié)論：通過對不同時間劑量、不同誘導(dǎo)時間窗下小鼠腦缺血耐受的研究,以10min腦缺血作為預(yù)處理,可對間隔5天后30min腦缺血引起的腦神經(jīng)細胞損傷產(chǎn)生一定的保護作用,因此預(yù)缺血10min+再次缺血30min、120h誘導(dǎo)時間窗為比較合適的腦缺血耐受時間;柿葉黃酮、生姜揮發(fā)油、毛冬青總黃酮以及川芎嗪注射液均具有不同程度的增強腦保護作用,促進腦缺血耐受形成;毛冬青總黃酮具有很