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文檔簡介
1、目的:探究TPM3在大鼠胰腺癌細(xì)胞中對其生物學(xué)行為的影響并初步闡述其可能的分子機制。
方法:⑴通過在大鼠胰腺中包埋DMBA的方法建立大鼠胰腺癌模型。⑵對差異蛋白TPM3進行免疫組化驗證。⑶通過機械分離和酶階段消化分離胰腺癌組織的方法獲取大鼠胰腺癌細(xì)胞,體外傳代培養(yǎng)獲得純度較高的細(xì)胞后,應(yīng)用siRNA敲低大鼠胰腺癌細(xì)胞中TPM3基因的表達;通過RT-PCR技術(shù)檢測其沉默效果。⑷通過Transwell實驗和平板克隆實驗分別對細(xì)胞的
2、侵襲、遷移能力及生長增殖能力進行觀察。
結(jié)果:①經(jīng)病理驗證模型組有37.83%(14/37)形成胰腺癌,證明大鼠胰腺癌模型建立成功。②免疫組化驗證胰腺癌組織中TPM3陽性率明顯高于正常胰腺組織。③RT-PCR結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染TPM3-siRNA的細(xì)胞中TPM3的表達量明顯低于其余各組(P<0.05),其余各組之間TPM3表達量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。④轉(zhuǎn)染TPM3-siRNA的細(xì)胞其侵襲、遷移能力及生長增殖能力較對照組
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