肝型脂肪酸結(jié)合蛋白與親脂性藥物的相互作用的研究.pdf

1、肝型脂肪酸結(jié)合蛋白是存在于細胞胞質(zhì)溶液中能夠結(jié)合長鏈脂肪酸的小分子蛋白，分子量在14-15kD左右，它不僅存在于肝臟，還在小腸和腎臟中表達。眾所周知，iFABPs能夠結(jié)合各種各樣的兩性分子，并伴隨著不同的親和力和特異性。在iFABPs家族中，LFABP的特異性是最為廣泛的。它的結(jié)合區(qū)域很大，遠大于結(jié)合脂肪酸所必需的空間，因此推測蛋白可能有能力結(jié)合其它一些疏水性或者兩性小分子，比如親脂性藥物，關(guān)于其和小分子之間的相互的作用已有報道，但其和

2、親脂性藥物的相互作用沒有得到重視。 本文闡述幾種結(jié)構(gòu)不同的親脂性藥物以及親水性藥物Diltiazem與肝臟脂肪酸結(jié)合蛋白的結(jié)合，并設(shè)計了一個突變體來比較結(jié)合力以及結(jié)合位點的變化，運用圓二色譜儀、熒光分光光度計、核磁共振儀等儀器對其間接和直接的相互作用進行對比分析，從不同的角度來發(fā)現(xiàn)它們之間存在的關(guān)系。我們發(fā)現(xiàn)這些化合物與蛋白結(jié)合力大小不同，順序為Indomethacin>ketoprofen>S-Ketoprofen>lbupr

3、ofen>S-Ibuprofen>Diltiazem，結(jié)合力不直接與水溶性或者化合物的分配系數(shù)有關(guān)，同時我們也發(fā)現(xiàn)水溶性藥物Diltiazem與LFABP有較弱的結(jié)合力。通過分析藥物與肝臟脂肪酸結(jié)合蛋白結(jié)合后NMR譜中化學(xué)位移的變化，可以知道藥物和肝臟脂肪酸結(jié)合蛋白相互作用后氨基酸的變化，藥物結(jié)合于蛋白的空腔中。每種藥物以不同的方式結(jié)合在蛋白的腔中，但是，一系列相同的的接觸位點與脂肪酸的一樣。通過這些數(shù)據(jù)，可以推測由于非脂肪酸的親脂性藥