牙髓牙本質(zhì)復(fù)合體組織學(xué)染色方法的改良.pdf

1、牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體(pulp-dentin complex)是牙齒的基本組成部分，同時(shí)也是執(zhí)行牙齒生理功能的重要組織結(jié)構(gòu)[1]。而牙髓疾病是困擾人類(lèi)的常見(jiàn)病、多發(fā)病，其發(fā)生發(fā)展過(guò)程均與牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體組織結(jié)構(gòu)的改變有關(guān)。因此，越來(lái)越多的學(xué)者關(guān)注對(duì)于牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的研究。在目前的研究技術(shù)中，大多是通過(guò)組織切片染色、血管造影等，之后光鏡或電鏡下觀察成像。由于牙髓被致密的硬組織包圍，觀察其三維立體形態(tài)難度較大，而且在同一個(gè)體中，對(duì)于成牙

2、本質(zhì)細(xì)胞、神經(jīng)、血管這三種組織的具體分布及空間走向的認(rèn)識(shí)迄今并不透徹。本實(shí)驗(yàn)從了解牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體中重要組織結(jié)構(gòu)的形態(tài)學(xué)特征入手，分別采用Holmes還原銀染色法配合改良HE染色及過(guò)碘酸-銀-烏洛托品(Periodic Aeid-Silver-Methenamine，PASM)配合蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin，HE)染色，光鏡下觀察牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體中重要組織結(jié)構(gòu)的分布、走向及不同組織間的相互關(guān)系，以期能夠?qū)ρ浪?

3、牙本質(zhì)復(fù)合體的主要組織結(jié)構(gòu)有一個(gè)統(tǒng)一的認(rèn)識(shí)，從而在形態(tài)學(xué)上進(jìn)一步豐富牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的基礎(chǔ)理論。 目的：從形態(tài)學(xué)的研究著手，通過(guò)系列實(shí)驗(yàn)，探討進(jìn)一步認(rèn)識(shí)牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體組織形態(tài)特征的方法，深入了解牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體內(nèi)部復(fù)雜的組織結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，為臨床牙髓病治療提供理論依據(jù)。 方法：選擇因正畸治療拔除的無(wú)齲前磨牙，處理后暴露牙本質(zhì)，經(jīng)10％福爾馬林固定，8％硝酸脫鈣常規(guī)組織切片。分別采用Holmes還原銀染色法配合改良HE染

4、色及改良過(guò)碘酸-銀-烏洛托品(PASM)染色套染蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察牙髓-牙本質(zhì)復(fù)合體的組織結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：Holmes還原銀染色法結(jié)果顯示，光鏡下神經(jīng)纖維組織呈黑色，可見(jiàn)牙髓中神經(jīng)纖維組織多分布于小血管、細(xì)胞周?chē)?，神?jīng)纖維末梢分布均勻、形態(tài)規(guī)則、粗細(xì)均勻；通過(guò)HE復(fù)染，染色背景呈淺紅色，可分辨出牙髓血管的走行方向，細(xì)胞形態(tài)大致可見(jiàn)。改良PASM染色配合HE復(fù)染后的切片背景呈淺紅色，神經(jīng)纖維組織呈黑色網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，牙髓

5、端有螺旋狀神經(jīng)纖維穿過(guò)成牙本質(zhì)細(xì)胞層進(jìn)入前期牙本質(zhì)，前期牙本質(zhì)內(nèi)有一定數(shù)量呈彎曲狀的神經(jīng)纖維分布，走行方向與牙本質(zhì)小管基本一致；牙髓內(nèi)的血管、細(xì)胞亦清晰可見(jiàn)。 結(jié)論：通過(guò)Holmes還原銀染色法配合改良HE染色及改良PASM染色結(jié)合HE復(fù)染，均可獲得牙髓微血管、細(xì)胞、神經(jīng)組織多重結(jié)構(gòu)的清晰圖像；相比較于Holmes還原銀染色法，改良PASM染色法對(duì)牙本質(zhì)神經(jīng)的成像有更強(qiáng)的特異性，在神經(jīng)染色的應(yīng)用方面優(yōu)勢(shì)明顯；而Holmes還原銀