蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)大鼠腎性高血壓的干預(yù)研究.pdf

1、目的：通過(guò)檢測(cè)血清炎癥因子白介素—6（Interleukin—6，IL—6）、腫瘤壞死因子—α（Tumor necrosis factor—α，TNF—α）、C反應(yīng)蛋白（C—reactive protein，CRP）的含量以及腫瘤壞死因子—α（TNF—α）在心肌組織內(nèi)的表達(dá)，探討蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)大鼠腎性高血壓血壓及心肌損傷的保護(hù)機(jī)制。 方法：選取2月齡健康雄性SD大鼠80只，隨機(jī)分為正常組10只與手術(shù)組70只，手術(shù)組采用結(jié)扎左

2、側(cè)腎動(dòng)脈的方法建立腎性高血壓大鼠模型，其中假手術(shù)組10只，只分離左側(cè)腎動(dòng)脈不結(jié)扎，兩周后，通過(guò)尾套法測(cè)定大鼠收縮壓，收縮壓高于基礎(chǔ)血壓20mmHg，且收縮壓高于115mmHg者被認(rèn)為造模成功（模型不成功者20只，成功者40只）。造模成功的腎性高血壓大鼠隨機(jī)分為高血壓模型對(duì)照組（簡(jiǎn)稱(chēng)模型組）、蛭龍活血通瘀膠囊高劑量組（簡(jiǎn)稱(chēng)高劑量組）、蛭龍活血通瘀膠囊中劑量組（簡(jiǎn)稱(chēng)中劑量組）、蛭龍活血通瘀膠囊低劑量組（簡(jiǎn)稱(chēng)低劑量組），普通飼養(yǎng)4周后，大鼠腎

3、性高血壓所致心肌肥厚已形成，分組灌胃，高、中、低劑量組分別給予1．6g/kg、0．8g/kg、0．4g/kg蛭龍活血通瘀膠囊灌胃，1次/日，共八周，其中正常組、假手術(shù)組及模型組給予等容量生理飲水灌胃，時(shí)間同上。給藥八周后，大鼠稱(chēng)重，2%的巴比妥鈉45mg/kg經(jīng)腹腔注射麻醉，開(kāi)胸從下腔靜脈取血3—5ml，靜置4小時(shí)，以1500r/min離心10分鐘制備血清，—70℃保存?zhèn)溆?。采用ELISA法測(cè)定血清IL—6、TNF—α的濃度，采用放射免

4、疫法測(cè)定血清CRP的濃度。取血后立即取出心臟，去除心房、右室游離壁、大血管和心包組織，迅速分離左心室稱(chēng)重（包括室間隔），計(jì)算左室重量指數(shù)=左室濕重／體重（mg/g）。在左室中部切部分心肌用4%多聚甲醛溶液固定，常規(guī)石蠟包埋、切片。HE染色光鏡觀察心肌組織病理學(xué)改變。采用免疫組化法檢測(cè)心肌組織TNF—α的表達(dá)。 結(jié)果：1．一般行為觀察實(shí)驗(yàn)期間，正常組及假手術(shù)組大鼠毛色光澤，行動(dòng)敏捷，對(duì)周?chē)兓磻?yīng)靈敏。模型組及低劑量組大鼠后期毛色

5、逐漸失去光澤，狀態(tài)萎靡，行動(dòng)遲緩，倦臥。高劑量組、中劑量組大鼠經(jīng)治療五周后精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，毛色逐漸有光澤。2．蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)腎性高血壓大鼠血壓的影響①基礎(chǔ)血壓假手術(shù)組、模型組、高、中、低劑量組大鼠血壓較正常組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05）。②手術(shù)后兩周血壓假手術(shù)組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組大鼠的血壓較正常組大鼠的血壓比較，除假手術(shù)組變化不大外（P>0．05），其余均明顯增高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。③治療后各組血壓

6、的變化治療八周后，與模型組大鼠的血壓比較，高、中劑量組血壓明顯降低（P<0．05），低劑量組無(wú)明顯改變無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較有明顯差異（P<0．05），但高劑量組與中劑量組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05）。3．蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)大鼠腎性高血壓心肌指數(shù)的影響模型組與正常組、假手術(shù)組比較LVB/BW均明顯增高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），高劑量組、中劑量組及低劑量組與模型組比較前兩者明顯降

7、低具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），低劑量組無(wú)明顯降低無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較明顯降低有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），高劑量組與中劑量組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05）。4．蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)大鼠腎性高血壓炎癥因子的影響模型組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α較正常組、假手術(shù)組明顯升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），假手術(shù)組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α與正常組比較無(wú)明顯差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義（P>0．05），治療后高劑量組、中劑量組和低劑量組大鼠血清CRP、IL—6及TNF—α與模型組比較，高、中劑量組明顯降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），低劑量組無(wú)明顯降低無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），但高劑量組與中劑量組之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05）。5．心臟病理組織學(xué)改變模型組及低劑量組大鼠心肌細(xì)胞肥大，部分排列紊亂，周?chē)霈F(xiàn)大量的結(jié)締組織，高劑量組、中劑

9、量組大鼠心肌也有不同程度的心肌細(xì)胞肥大，排列紊亂，結(jié)締組織增生但較模型組和低劑量組輕，假手術(shù)組與正常組比較未見(jiàn)明顯的病理學(xué)改變。6．蛭龍活血通瘀膠囊對(duì)心肌組織TNF—α表達(dá)的影響模型組大鼠心肌TNF—α表達(dá)較正常組、假手術(shù)組心肌高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），假手術(shù)組心肌組織TNF—α表達(dá)較正常組心肌無(wú)明顯差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），高、中劑量組及低劑量組心肌TNF—α表達(dá)與模型組比較，高、中劑量組表達(dá)明顯降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0

10、．05），低劑量組降低不明顯無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05），高劑量組、中劑量組與低劑量組之間比較明顯降低有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），高劑量組與中劑量組之間比較無(wú)明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0．05）。 結(jié)論：1．通過(guò)部分結(jié)扎一側(cè)腎動(dòng)脈致腎動(dòng)脈狹窄，成功制備了與免疫炎性損傷有關(guān)的大鼠腎性高血壓模型。2．蛭龍活血通瘀膠囊具有較好的降低腎性高血壓大鼠的血壓效果；蛭龍活血通瘀膠囊可防止腎性高血壓所致大鼠心肌肥厚，且兩者均具有一定量效關(guān)系。3．