紅霉素對慢性阻塞性肺疾病大鼠MMP-9水平的影響.pdf

1、目的：本實驗通過COPD大鼠模型并予以紅霉素干預觀察大鼠肺內MMP-9表達水平的變化。通過本實驗認識和探討體內實驗紅霉素對COPD大鼠肺內MMP-9表達的影響，進一步認識紅霉素的抗炎作用，開拓紅霉素在COPD的應用價值。 方法：健康雄性Wistar大鼠36只(中南大學實驗動物學部提供)，雄性，白色，SPF級，體重220±20 g。在安靜、室溫、避強光的環(huán)境中自由進食和飲水一周。36只Wister大鼠隨機分為3組，每組12只：CO

2、PD模型組，第1、14天注射脂多糖(LPS)200ug/100ul，第2～13天、15～30天每日上午在72升(30cm×40cm×60cm)自制有機玻璃箱內被動吸煙，每天上午1次，每次12支，每次持續(xù)0.5h。紅霉素干預組，造模方法同COPD組，每天熏煙前用紅霉素灌胃治療(劑量100mg/kg，配制成1.25％紅霉素口服液)，從第17天開始進行，經氣管內注入LPS的條件、煙熏條件以及持續(xù)時間均同COPD組，給藥2周；正常對照組，標準飼

3、養(yǎng)30天，不做任何干預，第1、14天氣管內注入生理鹽水100ul。大鼠肺功能測定由湘雅醫(yī)學院病理生理研究所完成，經微機處理計算出FEV0.3/FVC、R1及Cdyn。左肺10％的中性福爾馬林灌注固定20min，再浸入福爾馬林固定，常規(guī)脫水，石蠟包埋，切片，HE 染色，以進行病理形態(tài)學觀察和免疫組化檢測。用免疫組化方法檢測各組大鼠肺組織MMP-9的表達，逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription-polymerase

4、chain reaction，RT-PCR)檢測各組大鼠肺組織MMP-9 mRNA表達水平。 結果：(1)模型組及干預組大鼠漸出現(xiàn)飲食、活動減少，平均體重較正常對照組減輕，后期可見毛發(fā)干枯、發(fā)黃，可聽到喘息音，正常對照組未見以上情況出現(xiàn)。(2)模型組及干預組大鼠FEV0.3/FVC(％)、R1(氣道阻力)、Cdyn(動態(tài)肺順應性)均明顯低于正常對照組，差異有顯著性(均P(0.05)，說明小氣道氣道阻力增加，存在明顯氣流受限、阻塞

5、性肺通氣功能障礙。(3)光鏡下模型組及干預組大鼠肺組織符合慢性支氣管炎和阻塞性肺氣腫病理改變。(4)模型組肺組織中MMP-9蛋白平均陽性系數(shù)顯著高于對照組(P<0.05)，干預組與模型組比較陽性系數(shù)降低(P<0.05)。(5)模型組大鼠肺組織中MMP-9mRNA表達量高，其光密度比值顯著高于正常對照組(P<0.05)；干預組與模型組光密度比值比較亦降低(P<0.05)。 結論：(1)采用被動吸煙和LPS氣道內滴注相結合構建的大鼠