細顆粒物致人臍靜脈內皮細胞氧化損傷及人參皂甙Rgl干預研究.pdf

1、研究目的：
　　 從氧化應激角度探討細顆粒物(PM2.5)對人臍靜脈內皮細胞生長的影響以及人參皂甙Rgl(Rgl)的干預效果。并從基因分子水平研究Nrf2-ARE抗氧化應激通路中核因子E2相關因子2(Nrf2)和其下游蛋白血紅素氧合酶-1(HO-1)的變化規(guī)律。
　　 研究方法：
　　 以人臍靜脈內皮細胞為研究對象。篩選PM2.5合適的染毒濃度和人參皂甙Rg1的最適濃度。1、設空白對照組和PM2.5處理組(濃度分

2、別為0.1，0.2，0.4，0.8mg/ml)。2、再設空白對照組、0.8mg/mlPM2.5處理組、0.8mg/mlPM2.5+0.04mg/ml人參皂甙Rgl處理組和0.04mg/ml人參皂甙Rgl處理組。各組處理24h后用MTT法測定內皮細胞生長變化，熒光探針標記法測定內皮細胞活性氧(ROS)水平，RT-PCR法測定HO-1、Nrf-2mRNA表達水平。統(tǒng)計學處理多組間比較采用單因素方差分析檢驗。
　　 研究結果：

3、　　 在一定的濃度范圍內，隨著PM2.5染毒濃度加大，內皮細胞生長受抑，ROS水平升高，HO-1表達增多，HO-1上游轉錄調節(jié)元件Nrf2的表達無差異。PM2.5染毒濃度分別為0.1、0.2、0.4、0.8mg/ml時，細胞生長的光密度值（OD值）分別為0.67±0.10、0.63±0.11、0.59±0.06(P＜0.05)、0.48±0.07（P＜0.01）。ROS熒光灰度值分別為179±5、191±6、198±12、211±11

4、(均為P＜0.01)。HO-l平均光密度值分別為0.718±0.061、0.737±0.052、0.737±0.009、0.806±0.037(P＜0.01)。Nrf2平均光密度值分別為0.941±0.074、0.991±0.064、0.996±0.040、1.010±0.039（均為P＞0.05）。Rgl干預后與0.8mg/mlPM2.5組相比，細胞存活增多，ROS水平降低，HO-1表達增多，HO-1上游轉錄調節(jié)元件Nrf2表達仍無差

5、異。細胞生長OD值為1.06±0.17（P＜0.01），ROS熒光灰度值為147±13（P＜0.01），HO-1平均光密度值為o.874±0.040（P＜0.05>，Nrf2平均光密度值為1.039±0.061（P＞0.05）。
　　 研究結論：
　　 1、PM2.5抑制內皮細胞生長，氧化應激是其損傷機制之一。2、人參皂甙Rgl能抑制PM2.5損傷內皮細胞，抗氧化應激是其保護機制之一。3、在Nrf2-ARE抗氧化通路中N