一起青年學員急性傳染性肺炎暴發(fā)的病因?qū)W探究.pdf

1、背景：自2003年我國部分地區(qū)相繼先后出現(xiàn)嚴重急性呼吸綜合征（Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS）和禽流感（influent virus A-H5N1，H5N1）的流行以來，國內(nèi)外不斷有新的不明原因的發(fā)熱或傳染性肺炎局部暴發(fā)的報告，其中以肺炎支原體（Mycoplasma pneumoniae，MP）感染多見。研究統(tǒng)計表明肺炎支原體感染占社區(qū)獲得性肺炎（Community-acquired pne

2、umonia，CAP）的50％。各型流感病毒及軍團菌(Legionella pneumophila，L.Pneumophila)等也是社區(qū)獲得性肺炎的常見病原體之一。冬春季為呼吸道疾病發(fā)病的高峰期，并且在一些擁擠的環(huán)境中如療養(yǎng)院、監(jiān)獄、巡航的艦船以及新兵營等更易暴發(fā)感染。肺炎支原體感染不只是表現(xiàn)為呼吸道感染，也可表現(xiàn)為全身多器官損傷綜合征，國內(nèi)外文獻頻繁報道肺炎支原體感染引起皮膚、神經(jīng)系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、血液系統(tǒng)及心血管系統(tǒng)等重要臟器的嚴重

3、并發(fā)癥。社區(qū)獲得性肺炎的暴發(fā)流行不僅與環(huán)境因素有關(guān)，更重要的是缺乏有效的早期診斷手段。而在疫情的早期要鑒別病毒抑或支原體感染亦較困難。針對近來我省某些院校多次出現(xiàn)不明原因疫情爆發(fā)的現(xiàn)狀，本實驗中選取其中幾種常見和新型病原體建立早期、特異且快速的實時熒光定量聚合酶鏈反應（Real-time polymerase chain reaction，實時熒光定量PCR）法，并聯(lián)合血清學檢測法和高通量擴增測序法來明確疫情的病因，同時用于此后疫情的監(jiān)

4、測。
　　 目的：建立能特異、快速且有效地檢測5種病原體感染的實時熒光定量PCR方法，并從血清學和基因水平探究一起青年學員急性傳染性肺炎暴發(fā)的病因。
　　 研究對象與方法：2007年12月-2008年1月期間某學院爆發(fā)了一起不明原因發(fā)熱疫情，其中71例在我科住院治療，我們在承接疫情診療時及時收集到71例患者的急性期和恢復期血清各一份；采用酶聯(lián)免疫吸附測定（Enzyme linked immunosorbent assay

5、，ELISA）法檢測血清中的抗常見呼吸道病原體抗體；用已知的5種病原體標準株通過克隆后得到標準曲線，即建成可以用于臨床標本的相應實時熒光定量PCR法。提取血清樣本中的DNA/RNA，采用實時熒光定量PCR法檢測病原體核酸；并用普通聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）法隨機擴增病原體核酸后采用非選擇性高通量擴增測序法直接查找病原體核酸，將擴增產(chǎn)物通過Solexa分析系統(tǒng)直接測序分析。
　　 結(jié)

6、果：在71例患者的急性期和恢復期血清中檢測到抗肺炎支原體IgM和/或IgG陽性能診斷肺炎支原體感染者16例（22.5％）；實時熒光定量PCR檢測甲、乙型流感病毒、嗜肺軍團菌和支原體核酸均陰性；在非選擇性擴增出的582750條帶中，未見特征病毒序列出現(xiàn)；與限定物種數(shù)據(jù)庫比對，不存在人流感病毒 A型/B型、嗜肺軍團菌、肺炎支原體和鼻病毒等呼吸道相關(guān)病原體的基因片段。
　　 本實驗得出以下結(jié)論：1）血清學檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn)肺炎支原體的現(xiàn)癥感