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1、目的:探討中藥成份漢防己甲素對(duì)先天性膈疝動(dòng)物模型肺發(fā)育及肺動(dòng)脈高壓的影響及意義。 方法:25只成年雌性S-D大鼠隨機(jī)分為五組(每組5只):1.正常對(duì)照(NORMALCONTROL)組;2.膈疝生理鹽水(CDHNS)組;3.膈疝地塞米松(CDHDEX)組;;4.膈疝漢防己甲素(CDHTET)組;5.膈疝地塞米松+漢防己甲素(CDHDEX+TET)組。定時(shí)配種成功后,于配種后第9.5天,正常對(duì)照組孕鼠每只給予食用油灌胃,其余4組每只
2、給予Nitrofen115mg/只灌胃。配種后第18.5天,正常對(duì)照組每只腹腔內(nèi)注射生理鹽水2ml/d;膈疝地塞米松組每只腹腔內(nèi)注射地塞米松0.25mg/kg/d;膈疝漢防己甲素組每只給予漢防己甲素30mg/kg/d灌胃;膈疝地塞米松+漢防己甲素組每只腹腔內(nèi)注射地塞米松0.25mg/kg/d+漢防己甲素30mg/kg/d灌胃。膈疝生理鹽水組每只腹腔內(nèi)注射生理鹽水2ml/d;配種后第21天(預(yù)產(chǎn)期前24小時(shí)),在乙醚吸入麻醉下對(duì)所有孕鼠行
3、剖宮產(chǎn),剖出胎鼠處死后,取出兩側(cè)肺組織,記錄胎鼠體重和肺重,觀察胎鼠有無(wú)膈疝、膈疝的位置、疝孔的大小,并將肺組織進(jìn)行內(nèi)皮素免疫組化染色和圖像分析,對(duì)胎鼠肺內(nèi)內(nèi)皮素表達(dá)進(jìn)行定位、定量分析,所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:配種未成功1只。正常對(duì)照組4只雌鼠共產(chǎn)仔38只,均無(wú)膈疝形成。其余4組雌鼠20只灌胃死亡1只,余19只共產(chǎn)仔126只,有膈疝形成者57只,致畸率45.2%。膈疝組中肺重與體重之比(Lw/Bw)均小于正常對(duì)照組,其差
4、異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。膈疝組中生理鹽水組Lw/Bw小于DEX、TET、T+D各組,其差異亦均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。地塞米松、漢防己甲素及地塞米松+漢防己甲素組間Lw/Bw差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。正常對(duì)照組肺小血管及細(xì)支氣管管壁菲薄,而膈疝生理鹽水組肺小血管及細(xì)支氣管管壁明顯增厚,膈疝地塞米松、膈疝漢防己甲素、膈疝地塞米松+漢防己甲素各組肺小血管及細(xì)支氣管變化介于前兩者之間。圖像分析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:各實(shí)
5、驗(yàn)組之間肺小血管及細(xì)支氣管管壁厚度及面積差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。內(nèi)皮素在胎鼠肺血管內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌,細(xì)支氣管粘膜上皮和平滑肌,肺泡上皮均呈陽(yáng)性表達(dá),血管內(nèi)皮及支氣管上皮陽(yáng)性表達(dá)較平滑肌和肺間質(zhì)明顯。其中膈疝生理鹽水組表達(dá)最強(qiáng),其次為膈疝地塞米松組、膈疝漢防己甲素組、膈疝地塞米松+漢防己甲素組,正常對(duì)照組表達(dá)最弱。圖像分析及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示:各實(shí)驗(yàn)組之間內(nèi)皮素在高倍視野中、肺小動(dòng)脈、細(xì)支氣管表達(dá)強(qiáng)度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而且肺小動(dòng)脈和細(xì)支氣管兩者管
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