TNF-α、IFN-γ誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞β-防御素表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察腫瘤壞死因子-α (TNF-α)、干擾素-γ(IFN-γ)誘導(dǎo)人角質(zhì)形成細(xì)胞系(Hacat細(xì)胞)β-防御素(hBD)表達(dá)情況，探討人角質(zhì)形成細(xì)胞hBD誘導(dǎo)表達(dá)途徑的可行性，了解β-防御素表達(dá)調(diào)控的基本規(guī)律，為指導(dǎo)β-防御素的進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。 方法：將Hacat細(xì)胞培養(yǎng)于含有10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，取生長(zhǎng)旺盛的細(xì)胞分為八組：12小時(shí)對(duì)照組、24小時(shí)對(duì)照組、TNF-α干預(yù)12小時(shí)組、TNF-α干預(yù)2

2、4小時(shí)組、IFN-γ干預(yù)12小時(shí)組、IFN-γ干預(yù)24小時(shí)組、TNF-α+IFN-γ干預(yù)12小時(shí)組、TNF-α+IFN-γ，干預(yù)24小時(shí)組，將40ng/ml TNF-α、40ng/ml IFN-γ、40ng/ml TNF-α+40ng/mlIFN-γ，分別加入相應(yīng)的培養(yǎng)瓶中與Hacat細(xì)胞共培養(yǎng)12小時(shí)、24小時(shí)后提取總RNA，RT-RCR(反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng))方法檢測(cè)hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表達(dá)，使用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件(

3、版本：11.0)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行析因設(shè)計(jì)的方差分析。 結(jié)果：HBD-2mRNA、hBD-3mRNA在Hacat細(xì)胞中均有微量表達(dá)；TNF-α干預(yù)組Hacat細(xì)胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA相對(duì)對(duì)照組表達(dá)增高(p<0.05)，且TNF-α干預(yù)12h時(shí)Hacat細(xì)胞中hBD-2mRNA、hBD-3mRNA的表達(dá)量高于干預(yù)24h時(shí)的表達(dá)量：IFN-γ干預(yù)組Hacat細(xì)胞中hBD-3mRNA相對(duì)對(duì)照組表達(dá)增高(p<0.05)，

4、且IFN-γ干預(yù)12h時(shí)Hacat細(xì)胞中hBD-3mRNA的表達(dá)量高于干預(yù)24h時(shí)的表達(dá)量，但I(xiàn)FN-γ對(duì)Hacat細(xì)胞中hBD-2mRNA的表達(dá)無(wú)作用(p>0.05)；在誘導(dǎo)Hacat細(xì)胞hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表達(dá)的過(guò)程中，時(shí)問(wèn)、TNF-α、IFN-γ三因素具有交互作用(p<0.05)，TNF-α與IFN-γ聯(lián)合干預(yù)Hacat細(xì)胞12h時(shí)，hBD-2mRNA、hBD-3mRNA表達(dá)量最高。 結(jié)論：人角質(zhì)形成細(xì)胞