γ-IFN誘導(dǎo)NB細(xì)胞分化及TrkA表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文γIFN誘導(dǎo)NB細(xì)胞分化及TrkA表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究姓名：張繼紅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：張錦華2000.4.1三者之間的關(guān)系。這～研究目的在于揭示NB細(xì)胞分化的分子生物學(xué)機(jī)理；且探索7IFN誘導(dǎo)KCNR細(xì)胞系分化的最佳作用時(shí)間及應(yīng)用劑量。這一課題研究的成功可為NB細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及臨床治療提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法一、細(xì)胞培養(yǎng)：人NBSMS—KCNR細(xì)胞系經(jīng)復(fù)蘇后，常規(guī)培養(yǎng)，每3天換液一次。細(xì)胞覆蓋瓶底面積

2、80％以上時(shí)，用吸管吹開分瓶傳代。二、實(shí)驗(yàn)分組：將7IFN用細(xì)胞培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液配成三種不同濃度(500]U／ml、1000IU／ml、2000IU／m1)的培養(yǎng)液，4‘C保存。使用時(shí)空白對(duì)照組(不加藥組)直接換入正常培養(yǎng)液；甲、乙、丙實(shí)驗(yàn)組分別換入含7一IFN500IU／ml、1000IU／ml、2000IU／ml的培養(yǎng)液。三、觀察指標(biāo)：、1活細(xì)胞計(jì)數(shù)。；取指數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，接種至24孔培養(yǎng)板，實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)液換成丙組培養(yǎng)液，分別于O時(shí)，1

3、天，4厭，7天，10天計(jì)數(shù)活細(xì)胞。采用02％，臺(tái)盼藍(lán)作拒染試驗(yàn)判定細(xì)胞活性，不著色細(xì)胞為活細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)。∥∥沁2細(xì)胞形態(tài)學(xué)改璺&用柞分北研究的細(xì)胞，接種在100ml培養(yǎng)瓶中。甲、乙、雨實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組同時(shí)接種。處理封爵，分別于，O時(shí)，1天，4天。7天一。天在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)及分化情況。根據(jù)Sandquist法細(xì)臌形態(tài)分化標(biāo)準(zhǔn)為存一個(gè)或一個(gè)以上的軸突長(zhǎng)度延伸至胞體直徑_；：|；倍略暈。一37IFN對(duì)TrkA口R：卜擤表達(dá)的影