鈣載體誘導(dǎo)CML細(xì)胞分化成樹突狀細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究鈣載體(CIA23187)誘導(dǎo)慢性髓性白血病(CML)細(xì)胞分化成樹突狀細(xì)胞(DCs)的作用；了解誘導(dǎo)產(chǎn)生的DCsP210蛋白的表達(dá)及其刺激自身T細(xì)胞產(chǎn)生針對(duì)CML細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。 方法：用CI和粒-單集落刺激因子(GM-CSF)聯(lián)合誘導(dǎo)CML病人骨髓來(lái)源的單個(gè)核細(xì)胞，通過(guò)倒置顯微鏡和電鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)變化和超微結(jié)構(gòu)，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面分化抗原的變化和變化過(guò)程；通過(guò)蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)(Westernblot)來(lái)檢測(cè)

2、CML特異的腫瘤標(biāo)志物P210蛋白在DCs中的表達(dá)；通過(guò)乳酸脫氫酶(LDH)實(shí)驗(yàn)來(lái)評(píng)估CI誘導(dǎo)的DCs刺激自身T細(xì)胞產(chǎn)生抗CML細(xì)胞的細(xì)胞毒作用。 結(jié)果：CML細(xì)胞經(jīng)CI和GM-CSF聯(lián)合誘導(dǎo)96小時(shí)后在倒置顯微鏡和電鏡下觀察到有典型的DCs的形態(tài)形成；流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示CD83、CD86、CD80、HLA-DR、CD40等表面分化抗原的表達(dá)顯著提高；蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)表明生成的DCs有P210蛋白的表達(dá)，但與未經(jīng)誘導(dǎo)的CML單個(gè)