人表皮干細(xì)胞分化成成釉細(xì)胞的研究.pdf

1、福建師范大學(xué)碩士學(xué)位論文人表皮干細(xì)胞分化成成釉細(xì)胞的研究姓名：杜生榮申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：發(fā)育生物學(xué)指導(dǎo)教師：張彥定20090501中文文摘中文文摘隨著年齡的增長(zhǎng)，所有的人都有不同程度的牙齒缺失和缺陷，因此，人類牙齒再生是一項(xiàng)極具市場(chǎng)價(jià)值和社會(huì)效益的工作。有關(guān)牙齒再生的研究已經(jīng)做了很多的工作，將兔子的切牙牙胚上皮和間充質(zhì)打散，植入到雞胚的尿囊絨毛膜培養(yǎng)，可以得到牙齒的結(jié)果；將書牙胚打散后，植入到腎囊膜，也可以形成牙齒結(jié)構(gòu)；借助支架技術(shù)

2、，把豬的磨牙牙胚細(xì)胞打到支架里，也可形成牙齒。牙齒的發(fā)育需要依靠牙上皮細(xì)胞和牙間充質(zhì)細(xì)胞相互誘導(dǎo)。基于這個(gè)原理，人們用間充質(zhì)來(lái)源的干細(xì)胞代替牙間充細(xì)胞與牙上皮重組，來(lái)探討間充質(zhì)干細(xì)胞是否能被誘導(dǎo)，參與牙齒再生?，F(xiàn)在研究比較熱的間充干細(xì)胞有牙髓干細(xì)胞，骨髓干細(xì)胞，神經(jīng)干細(xì)胞，胚胎干細(xì)胞，但是據(jù)目前的報(bào)道，間充質(zhì)來(lái)源的干細(xì)胞只能被誘導(dǎo)為類牙髓樣的結(jié)構(gòu)；而用表皮干細(xì)胞代替牙上皮來(lái)支持牙齒再生，國(guó)際上尚沒(méi)有報(bào)道，所以本實(shí)驗(yàn)研究目的就是探索表皮干

3、細(xì)胞是否能被誘導(dǎo)為成釉細(xì)胞，參與牙齒再生，同時(shí)也為理解牙齒再生的機(jī)理提供實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，建立人類再生牙齒的技術(shù)模型，對(duì)干細(xì)胞在組織工程領(lǐng)域中的應(yīng)運(yùn)也有普遍意義。本實(shí)驗(yàn)首先建立了表皮干細(xì)胞的培養(yǎng)體系，其中成纖維條件培養(yǎng)液可以提供表皮干細(xì)胞的所必需的因子，在這種培養(yǎng)體系中表皮干細(xì)胞可以增殖，而且克隆邊界很明顯，并且有利于表皮干細(xì)胞表型的維持，也間接說(shuō)明成纖維細(xì)胞可以作為相同來(lái)源的表皮干細(xì)胞的滋養(yǎng)層，為解決表皮干細(xì)胞的傳代問(wèn)題奠定一定的基礎(chǔ)。同時(shí)用

4、目前比較常用的表皮干細(xì)胞的標(biāo)記物K15，K19，CD29來(lái)檢測(cè)表皮干細(xì)胞的分布，發(fā)現(xiàn)表皮干細(xì)胞都集中分布在皮膚基底層，并且在毛囊中分布比較廣，這與先前文獻(xiàn)報(bào)道的一致；同時(shí)我們用細(xì)胞免疫組化的方法檢測(cè)分離的表皮干細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其純度可以達(dá)到90％，可以作為牙齒組織工程的種子細(xì)胞。第二，在FGF8生長(zhǎng)因子存在的情況下，用表皮干細(xì)胞膜片與E135天的牙間充質(zhì)細(xì)胞重組，腎囊膜移植三周，組織學(xué)切片，HE染色發(fā)現(xiàn)表皮干細(xì)胞被誘導(dǎo)為成釉細(xì)胞，并且成釉細(xì)胞