人角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)天皰瘡抗原的研究.pdf

1、為了研究培養(yǎng)的人角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)天皰瘡抗原的情況,研究人員通過(guò)提高培養(yǎng)基中的鈣離子濃度或UVB照射,利用免疫熒光和免疫印跡技術(shù)來(lái)檢測(cè)人有質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)抗原的變化.實(shí)驗(yàn)分為三部分:第一、通過(guò)改變培養(yǎng)基中的鈣離子濃度,觀察尋常型天皰瘡(PV)和落葉型天皰瘡(PF)抗原出現(xiàn)的時(shí)間,從而認(rèn)識(shí)天皰瘡抗原與角質(zhì)形成細(xì)胞分化間的關(guān)系.第二、利用不同方法提取表皮總蛋白作為天皰瘡抗原,進(jìn)行SDS-PAGE和免疫印跡檢測(cè),初步探索出應(yīng)用該方法檢測(cè)天皰瘡抗原

2、的條件.第三、應(yīng)用UVB照射培養(yǎng)的角質(zhì)形成細(xì)胞,觀察單層細(xì)胞有無(wú)表達(dá)PF抗原,進(jìn)一步研究有些PF日曬后病情加重,是否與日光引起PF抗原表達(dá)相關(guān).結(jié)論:1、單層角質(zhì)形成細(xì)胞可以表達(dá)PV抗原,而只有復(fù)層化的角質(zhì)形成細(xì)胞才能表達(dá)出PF抗原.鈣離子可刺激細(xì)胞復(fù)層化,并且促進(jìn)PF抗原的表達(dá),鈣離子濃度愈高,作用時(shí)間愈長(zhǎng),PF抗原表達(dá)愈明顯.2、三種提取表皮蛋白的方法均可以獲得所需的蛋白質(zhì),中性蛋白酶分離法得到蛋白量最多,免疫印跡技術(shù)是一種敏感特異