血清饑餓處理對人角質形成細胞系HaCaT細胞自噬的調控效應研究.pdf

1、細胞的自穩(wěn)是通過對細胞內成分合成和降解的精確調節(jié)而實現。細胞內降解物質的途徑有兩類，一類是蛋白酶體途徑，主要降解短壽命蛋白質，還有一類就是自噬途徑，主要降解長壽命蛋白質及細胞器。自噬存在于所有的真核細胞中，它對于保持細胞內環(huán)境穩(wěn)定很重要。自噬可分為三類:巨自噬(macroautophagy)、微自噬(mieroautophagy)和分子伴侶介導的自噬(chap ronemediated autophagy)。巨自噬是胞漿內成份進行循環(huán)的

2、主要途徑，通常所說的自噬就是指巨自噬。饑餓是細胞自噬最為重要的誘導因素，然而目前饑餓對角質形成細胞自噬調控效應的研究資料較為缺乏。
　　 目的：研究血清饑餓處理對人角質形成細胞系HaCaT細胞自噬的調控效應，并初步分析其分子機制，進而為通過調節(jié)細胞的自噬水平控制和治療皮膚病打下基礎。
　　 方法：對體外培養(yǎng)的HaCaT細胞進行血清饑餓處理，使用透射電鏡觀察超微結構改變，使用westem-blot方法進行自噬標志性分子LC

3、3Ⅱ蛋白表達分析，進而對mTOR的蛋白表達及其ser2448位點磷酸化產物水平進行分析。
　　 結果：電鏡觀察發(fā)現血清饑餓處理的細胞中有自噬體囊泡形成;western-blot顯示LC3Ⅱ蛋白表達較正常培養(yǎng)的細胞顯著上調。血清饑餓處理的細胞中mTOR的ser2448位點磷酸化產物水平顯著降低。
　　 結論：血清饑餓處理可以誘導HaCaT細胞發(fā)生自噬，并且這種自噬活性的誘導可能與自噬調控關鍵元件mTOR的ser2448位點