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1、目的:從人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移病灶標(biāo)本中提取總RNA,PCR擴(kuò)增PRL-3基因,并在大腸桿菌中表達(dá)并純化表達(dá)蛋白。 方法:收集人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移標(biāo)本,提取總RNA,逆轉(zhuǎn)錄為eDNA,PCR擴(kuò)增目的序列,T-A克隆于pMD-18T載體中,轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109株,提取質(zhì)粒,重組質(zhì)粒進(jìn)行PCR、酶切鑒定,經(jīng)雙酶切后的PRL-3片段再次連接至原核表達(dá)載體pQE-31,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109,篩選pQE-31-PRL-3重組質(zhì)粒,經(jīng)PCR、酶切與
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