PRL-3在人胃癌中的表達(dá)及其特異性SiRNA在體外干預(yù)的影響.pdf

1、目的：探討酪氨酸磷酸酶PRL-3在胃癌組織中的表達(dá)情況及其特異性siRNA對(duì)胃癌細(xì)胞SGC901中PRL-3mRNA表達(dá)的干擾作用。 方法：1、收集福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院腫瘤科2004年59例手術(shù)切除胃癌組織及14例癌旁組織，采用免疫組化方法檢測PRL-3蛋白表達(dá)情況，并分析PRL-3表達(dá)與胃癌臨床病理學(xué)特征之間的關(guān)系；2、體外轉(zhuǎn)錄方法合成PRL-3特異性 siRNA、scrambled siRNA；3、通過陽離子脂質(zhì)體將si

2、RNA轉(zhuǎn)染入胃癌細(xì)胞SGC7901中用四甲基偶氮唑鹽(MTT)檢測PRL-3特異性siRNA在細(xì)胞生長中的作用，并篩選出最適合的轉(zhuǎn)染濃度；采用RT-PCR分別檢測轉(zhuǎn)染48小時(shí)后 SGC7901中PRL-3mRNA的表達(dá)情況；細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞遷移能力。 結(jié)果：1、PRL-3在胃癌組織中表達(dá)水平明顯高于癌旁胃粘膜組織(P=0.020)，其表達(dá)水平與浸潤深度(P=0.020)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.002)及TNM分期(P=0.00

3、2)有關(guān)，而與性別(P=0.149)、年齡(P=0.169)及分化程度(P=0.400)無關(guān)。2、不同濃度的siRNA都能對(duì)胃癌細(xì)胞SGC7901生長、增殖產(chǎn)生抑制作用，特別是濃度為．5nM的時(shí)候產(chǎn)生抑制作用最強(qiáng)；3、轉(zhuǎn)染PRL-3特異性siRNA組與轉(zhuǎn)染scrambled siRNA和空白對(duì)照組相比，半定量RT-PCR結(jié)果顯示目的基因PRL-3條帶的亮度低于scrambled siRNA對(duì)照組和空白對(duì)照組，而后兩者的亮度幾乎無明顯差別