NeuroD在大鼠脊髓損傷過(guò)程中的特異性表達(dá).pdf

1、目的
　　探討大鼠脊髓損傷過(guò)程中神經(jīng)源性分化因子(NeurogenicDifferentiation,NeuroD)的分布、變化及規(guī)律,進(jìn)而研究其對(duì)脊髓損傷模型的影響。
　　方法
　　SD大鼠腹腔麻醉,無(wú)菌條件下顯露并咬除T10棘凸及椎板,顯露其下方的硬脊膜,采用改良Allen’s打擊法進(jìn)行打擊建立急性脊髓損傷模型。假手術(shù)對(duì)照組同法暴露,但不損傷脊髓。建模成后采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)NeuroD在脊髓中分布情況;應(yīng)用RT

2、-PCR方法檢測(cè)在大鼠脊髓損傷不同時(shí)段NeuroDmRNA的表達(dá)變化;應(yīng)用蛋白質(zhì)免疫印跡(WesternBlotting)對(duì)NeuroD蛋白在鼠脊髓損傷不同階段的表達(dá)進(jìn)行半定量分析,進(jìn)而確定NeuroD在SCI大鼠脊髓中表達(dá)的規(guī)律。
　　結(jié)果
　　免疫組化提示NeuroD主要表達(dá)在脊髓灰質(zhì)中,白質(zhì)中未見(jiàn)陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞。NeuroD陽(yáng)性細(xì)胞經(jīng)常成團(tuán)排列,分布于損傷處與正常細(xì)胞的交界處。RT-PCR和蛋白免疫印跡結(jié)果提示Neuro

3、D在大鼠脊髓損傷后不同時(shí)期都有表達(dá):從脊髓損傷后第1天開(kāi)始,NeuroD的表達(dá)呈現(xiàn)明顯升高,在第5天達(dá)到最高峰,隨后逐漸降低。
　　結(jié)論
　　在大鼠脊髓損傷后的不同階段,NeuroD的表達(dá)在時(shí)間和空間上有明顯的變化差異:損傷后,NeuroD表達(dá)呈現(xiàn)升高的水平,到術(shù)后第5天達(dá)到最高峰;NeuroD主要成團(tuán)分布于損傷部位和正常細(xì)胞的交界處?？梢?jiàn),脊髓損傷會(huì)促進(jìn)NeuroD增生。推測(cè)NeuroD的主要作用是:1、在損傷后對(duì)神經(jīng)細(xì)胞