重慶煙草青枯菌生理分化及致病型測定研究.pdf

1、煙草青枯病是由茄科拉爾氏菌Ralstoniasolanacearum引起的一種細菌性維管束病害，對煙草的產(chǎn)量和質(zhì)量影響極大，是威脅世界煙草生產(chǎn)的一大毀滅性病害，其防治十分困難。從長遠的觀點看，只有使用抗病品種才是控制此病的根本出路。因此，為了給煙草抗病品種選育工作提供理論依據(jù)，應當研究當?shù)責煵萸嗫莶【N下分類情況，如生化型、生理小種及致病型的存在與分布情況。測定當?shù)責煵萸嗫菥纳汀⑸硇》N及致病型是抗源篩選、抗病品種選育與推廣中必須

2、解決的前提和基礎。本試驗從重慶煙區(qū)煙草典型病株上分離獲得若干分離株，對其進行人工培養(yǎng)及鞭毛染色，觀察菌體形態(tài)，進行致病性測定，鑒定其是否是具有致病性的煙草青枯菌菌株，進而測定供試菌株對三種雙糖、三種己醇的利用情況及對硝酸鹽的還原情況，并接種生理小種鑒別寄主，進行煙葉浸潤反應和黑色素產(chǎn)生試驗，接種一套煙草致病型鑒別品種，初步獲得重慶市煙草青枯菌生化型、生理小種及致病型的劃分測定情況，試驗研究結(jié)果如下： 1.經(jīng)過從煙草青枯病典型病株

3、中的分離，通過平板劃線法挑取典型單菌落，進行純化，得到若干分離株，將其分別在NA培養(yǎng)基、PDA培養(yǎng)基和TTC培養(yǎng)基上進行人工培養(yǎng)，觀察其菌落形態(tài)，經(jīng)過細菌鞭毛染色，菌體形態(tài)觀察，接種于云煙85測定致病性，最終篩選獲得44個具有致病性的煙草青枯菌菌株。它們分別來自重慶市黔江區(qū)、酉陽縣和武隆縣等地。 2.在同等條件下，注莖和葉腋針刺法的發(fā)病潛育期較傷根灌菌法短，注莖和葉腋針刺法在3、4天左右便可觀察到青枯病癥狀，傷根灌菌需要10天左

4、右；注莖和葉腋針刺法的接種植株死亡率100％，死亡時間也均比傷根灌菌法短，傷根灌菌法存在發(fā)病但未死的情況。 3.44個菌株均能利用乳糖、麥芽糖、纖維二糖、甘露醇、山梨醇、甜醇并產(chǎn)酸；均有脫氮作用，能使KNO3產(chǎn)生氮氣；能使KNO3還原，產(chǎn)生亞硝酸根。根據(jù)青枯菌生化型的劃分標準，44個菌株均為生化型Ⅲ，無其它型以及亞型。 4.44個菌株接種到一套生理小種鑒別寄主上發(fā)病率均為100％，致病力總體較強，但各菌株對不同鑒別寄主的

5、致病力存在一定的差異。供試菌株5-2-4、5-4-5、5-3-4、5-1-4、5-11-1、5-8-2、5-4-4、5-9-1、5-23-1、5-21-1接種6個鑒別寄主的平均病情指數(shù)均在90以上，它們分布在黔江區(qū)水田鄉(xiāng)、新華鄉(xiāng)，武隆縣黃鶯鄉(xiāng)、仙女山鎮(zhèn)。煙草、馬鈴薯、番茄、茄子對44個菌株反應很敏感，辣椒和花生的敏感性稍弱。44個菌株浸染云煙85的葉片24h后，所有浸染點均出現(xiàn)淡褐色斑點，60h以后，斑點顏色加深的程度各菌株之間略有差異

6、；44個菌株在L-酪氨酸培養(yǎng)基上均不同程度的產(chǎn)生黑色素，且產(chǎn)生黑色素的能力各菌株間略有不同?？梢源_定44個供試菌株為生理小種1號。 5.供試44個菌株依據(jù)它們在1套煙草致病型鑒別品種上的反應，可以劃分為2個致病型。Ⅰ型菌株致病力中等，平均病情指數(shù)為75.00，占供試菌株的6.82％；Ⅱ型菌株致病力強，平均病情指數(shù)為89.48，占供試菌株的93.18％；供試菌株中沒有弱致病力的菌株。Ⅰ型供試菌株6-2-1、6-1-1和6-1-2，