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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文神經(jīng)生長因子在大鼠牙髓機(jī)械刺激后表達(dá)變化的研究姓名:林莉申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:于靜濤2001.4.1應(yīng)用4%的多聚甲醛液心臟灌流,取上領(lǐng)骨及三叉神經(jīng)節(jié),上領(lǐng)骨需經(jīng)脫鈣處理,之后將上領(lǐng)骨及三叉神經(jīng)節(jié)置于20%的蔗糖磷酸鹽緩沖液中脫水,4℃過夜,待組織塊沉底,經(jīng)OCT包埋,使用恒冷切片機(jī)切片,厚度為17pm,矢狀連續(xù)切片6張,其中4張進(jìn)行免疫組化染色,另2張做HE染色。使用光鏡觀察NGF在神經(jīng)
2、節(jié)及牙髓中的分布,并使用Luzex一F顯微圖象分析儀測定三叉神經(jīng)節(jié)及牙髓中NGF的陽性細(xì)胞和陽性部位的灰度值(光強(qiáng)度),結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果l(1)正常對照組免疫組化染色后可見三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞中有個(gè)別細(xì)胞NGF染色陽性,牙髓中NGF染色陰性。HE染色見造牙本質(zhì)細(xì)胞排列整齊。(2)0小時(shí)組三叉神經(jīng)節(jié)中NGF陽性細(xì)胞增多,牙髓中NGF表達(dá)為弱陽性,HE染色可見牙髓中造牙本質(zhì)細(xì)胞排列紊亂。(3)3天組三叉神經(jīng)節(jié)中NGF陽性細(xì)胞達(dá)到最多,且染
3、色最深,牙髓中NGF強(qiáng)陽性表達(dá),主要分布在成牙本質(zhì)細(xì)胞層冠方,在相應(yīng)牙本質(zhì)小管中可見陽性著色,同時(shí)牙髓中造牙本質(zhì)細(xì)胞排列紊亂,并出現(xiàn)空泡性變。(4)5天組三叉神經(jīng)節(jié)中陽性細(xì)胞明顯減少,牙髓中N留表達(dá)弱陽性,HE染色可見牙髓中造牙本質(zhì)細(xì)胞排列較正常。2、圖象分析檢測各組大鼠三叉神經(jīng)節(jié)中及牙益中陽性細(xì)胞和陽性區(qū)域的灰度值,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果為:機(jī)械刺激后3天組三又神經(jīng)節(jié)及牙髓中陽性細(xì)胞和部位灰度值明顯低于其它各組,0小時(shí)組和5天組灰度值略低于
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