膿毒癥病兒手術(shù)前后干擾素-γ、白介素-4及淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的觀察.pdf

1、目的：膿毒癥（Sepsis）是創(chuàng)傷、燒傷、感染、大手術(shù)等臨床急危重病人的嚴(yán)重并發(fā)癥之一，也是誘發(fā)膿毒性休克（Septic Shock）、多器官功能障礙綜合征（Multipie Organ Dysfunction Syndrome，MODS）的重要原因，其本質(zhì)為不同感染性因素所致的失控性炎癥反應(yīng)，如細(xì)菌、真菌、病毒及其產(chǎn)物等均可誘發(fā)膿毒癥。近年來，有關(guān)膿毒癥發(fā)生規(guī)律與臨床意義的研究取得了一定的進(jìn)展，但膿毒癥、多器官功能障礙綜合征抗炎治療的

2、臨床試驗(yàn)并未取得預(yù)期的臨床效果，說明膿毒癥根本發(fā)病環(huán)節(jié)及作用機(jī)制有待深入研究。本研究通過對(duì)外科膿毒癥病兒的外周血干擾素-γ，（IFN-γ）、白介素-4（IL-4）水平監(jiān)測(cè)及淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)的研究，了解外科膿毒癥病兒機(jī)體的免疫反應(yīng)狀態(tài)，為臨床探索免疫調(diào)控治療提供一定的理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 （1）研究對(duì)象：膿毒癥組（S）：選擇本院外科收治的嚴(yán)重腹腔感染病兒30例（男20例，女10例），其中化膿性闌尾炎并腹膜炎26例，美

3、克爾憩室炎伴腹膜炎4例，所有病兒入院后依據(jù)2005年國(guó)際兒科膿毒癥會(huì)議確定的診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)估，均確診為膿毒癥。對(duì)照組（C）：選取同期查體健康同齡兒童30人，其中男22例，女8例。
　　 （2）標(biāo)本采集及檢測(cè)指標(biāo)：膿毒癥組（S）：分別于手術(shù)前（S0）和手術(shù)后第1天（S1）、第5天（S5）抽取靜脈血2ml，以3500rpm的速度離心5分鐘，取上清液，保存于-20℃冰箱中備用；并于同期采末梢血檢測(cè)血常規(guī)。對(duì)照組（C）：抽取靜脈血2ml

4、，以3500rpm的速度離心5分鐘，取上清液，保存于-20℃冰箱中備用。采末梢血檢測(cè)血常規(guī)。
　　 （3）檢驗(yàn)方法：采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定IFN-γ和IL-4濃度，操作過程嚴(yán)格按說明書操作，測(cè)定IFN-γ及IL-4的OD值，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)血清樣品的OD值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度。采用血細(xì)胞分析儀測(cè)定末梢血白細(xì)胞及淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)。
　　 （4）數(shù)據(jù)處理使用SP

5、SS10.0分析軟件，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果：
　　 1.膿毒癥組與對(duì)照組比較，性別、年齡間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。
　　 2.血清IFN-γ濃度：膿毒癥組手術(shù)前（10.92±2.30 pg/ml）與對(duì)照組（11.63±3.0 pg/ml）比較，差異無顯著性（P>0.05）；術(shù)后第1天（8.35±1.84pg/ml）與術(shù)前比較濃度下降，差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)后第5天（10.30±2.38p

6、g/ml）與術(shù)前比較，差異無顯著性（P>0.05）；術(shù)后第5天與對(duì)照組比較，濃度恢復(fù)到正常水平，差異無顯著性（P>0.05）。
　　 3.血清IL-4濃度：膿毒癥組手術(shù)前（78.3±24.88pg/ml）與對(duì)照組（23.15±7.25pg/ml）比較濃度升高，差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)后第1天（88.72±38.18pg/ml）與術(shù)前比較濃度升高，差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)后第5天（34.51±16.51pg/ml）

7、與術(shù)前比較濃度下降，差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)后第5天與對(duì)照組比較濃度仍高，未恢復(fù)至正常水平，差異有顯著性（P<0.01）。
　　 4.IFN-γ/IL-4：膿毒癥組手術(shù)前（0.16±0.07）與對(duì)（）組（0.53±0.17）比較（）直降低，差異有顯著性（）；術(shù)后第1天（0.12±0.06）與術(shù)前比較比值降低，差異有顯著性（P<0.05）；術(shù)后第5天（0.37±0.19）與術(shù)前比較比值增加，差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)

8、后第5天與對(duì)照組比較比值降低，差異有顯著性（P<0.01）。
　　 5.白細(xì)胞計(jì)數(shù)：膿毒癥組手術(shù)前白細(xì)胞計(jì)數(shù)（19.914±5.75x109/L）高于對(duì)照組（7.73±1.26x109/L），差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)前外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯高于術(shù)后第1天（15.72±5.06×109/L）及術(shù)后第5天（9.99±3.08×109/L），差異有顯著性（P<0.01）；術(shù)后第5天外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)高于對(duì)照組，未完全恢復(fù)至正常水平

9、，差異有顯著性（P<0.01）。
　　 6.外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)：膿毒癥組手術(shù)前外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)（3.74±1.62×109/L）與對(duì)照組（3.69±1.05×109/L）比較，差異無顯著性（P>0.05）；膿毒癥組外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)術(shù)前與術(shù)后第1天（3.80±1.97×109/L）及第5天（4.03±1.89×109/L）比較，差異無顯著性（P>0.05）；術(shù)后第5天外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)與對(duì)照組比較，差異無顯著性（P>0.05）

10、。
　　 結(jié)論：
　　 1.膿毒癥病兒Th1細(xì)胞應(yīng)答減弱，Th2細(xì)胞應(yīng)答增強(qiáng)，出現(xiàn)Th1/Th2平衡明顯向Th2偏移，表明膿毒癥病兒術(shù)前細(xì)胞免疫功能下降，存在免疫抑制狀態(tài)。
　　 2.外科手術(shù)打擊可以加劇Th1/Th2平衡向Th2偏移，加重免疫抑制。經(jīng)積極外科治療，機(jī)體可以逆轉(zhuǎn)Th1/Th2平衡向Th2偏移，恢復(fù)正常免疫功能。
　　 3.本試驗(yàn)外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)無下降，提示在膿毒癥病兒中.淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)不是