基于鄰苯二酚以及多指標(biāo)指紋圖譜的楊屬型蜂膠真?zhèn)舞b別方法的研究.pdf

1、蜂膠是蜜蜂從植物幼芽、樹(shù)皮與樹(shù)干裂縫上采集樹(shù)脂，并混入其上顎腺分泌物和蜂蠟加工而成的具芳香氣味的膠狀固體物。由于其廣泛的生物活性，目前蜂膠已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于食品、保健品以及化妝品等行業(yè)中。然而，由于蜂膠的生產(chǎn)受蜂種、采膠方式以及膠源等多個(gè)因素的影響，產(chǎn)量相對(duì)較低，難以滿(mǎn)足蜂產(chǎn)品市場(chǎng)日益增長(zhǎng)的需求量。
　　在我國(guó)，蜂膠的主要植物來(lái)源以楊屬（Populus）以及其雜交屬為主。由于楊屬型蜂膠與楊樹(shù)芽化學(xué)組成的高度相似性，一些不法商販利用楊

2、樹(shù)芽熬制楊樹(shù)膠冒充蜂膠的現(xiàn)象時(shí)有發(fā)生。楊樹(shù)膠在顏色、氣味、形狀上都與蜂膠十分相似，按照我國(guó)現(xiàn)有的蜂膠質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)無(wú)法將其區(qū)分開(kāi)來(lái)，因此蜂膠摻雜使假現(xiàn)象愈演愈烈。建立有效的楊屬型蜂膠真?zhèn)舞b別以及質(zhì)量評(píng)價(jià)方法，進(jìn)一步改進(jìn)和完善蜂膠質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，非常必要。
　　為了解決上述問(wèn)題，本研究以楊屬型蜂膠和楊樹(shù)膠為研究對(duì)象，利用分光光度法、紅外光譜、液相色譜、質(zhì)譜、色譜聯(lián)用、核磁共振等不同色譜光譜技術(shù)對(duì)楊樹(shù)膠中特征性化合物A進(jìn)行了鑒定，從植物源和蜜蜂雙

3、源角度進(jìn)行深入分析，探究其在蜜蜂加工蜂膠過(guò)程中的轉(zhuǎn)化機(jī)理，并利用高效液相色譜技術(shù)建立簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確的楊屬型蜂膠與楊樹(shù)膠的檢測(cè)方法。在此基礎(chǔ)上，本研究篩選楊屬型蜂膠中含量高、生物活性?xún)?yōu)越的特征性成分，利用高效液相色譜技術(shù)，建立楊屬型蜂膠的特征性指紋圖譜，并對(duì)特征活性成分進(jìn)行定量分析。具體研究結(jié)果如下:
　　1.楊樹(shù)芽中特征性化合物A的化學(xué)名稱(chēng)為鄰苯二酚，又稱(chēng)兒茶酚，其分子式為C6H6O2。
　　2.首次在蜂膠中檢測(cè)到了多酚氧

4、化酶的活性，并且證明了蜂膠中的多酚氧化酶來(lái)源于其膠源植物，并非蜜蜂自身腺體所分泌。該酶天然狀態(tài)下處于未激活狀態(tài)，僅在蜜蜂采集加工蜂膠時(shí)，破壞植物組織后才能將該酶激活，從而使楊樹(shù)芽中的鄰苯二酚化合物氧化為鄰苯二醌，消失于蜂膠中。
　　3.運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)，建立了一種以鄰苯二酚作為指標(biāo)的蜂膠與楊樹(shù)膠的鑒別方法。本研究以不同地理來(lái)源的蜂膠與楊樹(shù)膠為研究對(duì)象，在所檢測(cè)的楊樹(shù)膠中均檢測(cè)到了鄰苯二酚，其含量范圍為0.052～0.132 m

5、g/g，而在楊屬型、滔神菊屬型、桉樹(shù)型蜂膠中卻未檢測(cè)到該化合物。因此，該方法不僅可以應(yīng)用于楊屬型蜂膠、酒神菊屬型蜂膠、桉樹(shù)型蜂膠與楊樹(shù)膠的鑒別中;而且還能夠有效地鑒別出摻入5％以上楊樹(shù)膠的蜂膠樣品。
　　4.篩選楊屬型蜂膠中含量較高、生物活性較強(qiáng)的標(biāo)志性成分，運(yùn)用高效液相色譜技術(shù)建立楊屬型蜂膠的特征性指紋圖譜，并對(duì)不同地理來(lái)源的楊屬型蜂膠以及楊樹(shù)膠中標(biāo)志性成分進(jìn)行定量分析。研究發(fā)現(xiàn)，來(lái)源于中國(guó)的楊屬型蜂膠中均含有咖啡酸、阿魏酸、p

6、-香豆酸、肉桂酸、3，4-二甲氧基肉桂酸、高良姜素、柯因、松屬素、短葉松素、3-O-乙酰基短葉松素、異阿魏酸以及咖啡酸苯乙酯這12種化合物，其中高良姜素、柯因、松屬素、短葉松素以及3-O-乙?；倘~松素含量相對(duì)較高，而楊樹(shù)膠中僅含有其中的9種，咖啡酸、阿魏酸以及p-香豆酸均未在楊樹(shù)膠中檢出。同時(shí)在所檢測(cè)的蜂膠樣本中均未發(fā)現(xiàn)蘆丁以及楊梅酮。因此，該方法的建立不僅可以有效地將楊屬型蜂膠與楊樹(shù)膠區(qū)分開(kāi)來(lái)，還能夠?qū)μ砑訔顚僖约胺菞顚僦参镌次镔|(zhì)的